海洋中产胆固醇氧化酶细菌的筛选及其发酵条件优化

摘要：

利用菌落染色法从海洋中分离、筛选高产胆固醇氧化酶的菌株,所得菌株经分子生物学技术进行鉴定,采用单因素试验对其产酶条件进行优化,并利用硫酸铵沉淀、凝胶过滤层析法对酶进行分离纯化.结果表明,以胆固醇为唯一碳源,筛选出具有高胆固醇氧化酶活性的菌株XLH059,酶活力为0.407 U/mL;菌株XLH059被鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus);菌株XLH059的最佳产酶条件为发酵周期24 h,发酵温度26 ℃,接种量10％,初始pH值7.0,装液量100 mL/250 mL,转速200 r/min,最佳碳源和氮源分别为葡萄糖和蛋白胨,胆固醇含量0.5％.在此优化条件下,胆固醇氧化酶活力为0.72 U/mL,是优化前的1.76倍;经分离纯化获得分子质量约为59 kDa的胆固醇氧化酶.

关键词：胆固醇氧化酶、细菌、筛选、鉴定、发酵条件优化、分离纯化

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资助基金：国家高技术研究发展计划"863计划"2018YFC0311100;国家高技术研究发展计划"863计划"项目2014AA093512

在线出版日期：2019-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：36-41