在丝状真菌细胞内构建和筛选目的DNA文库

摘要：

本发明提供一种通过使用以附加型复制的AMA1为基础的质粒载体，在丝状真菌细胞内构建和筛选目的多核苷酸序列文库的方法，从而获得高频转化和稳定而常规的一致的高水平基因表达。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN99812660.8

申请日期：1999-10-13

公开/公告号：CN1324402

公开/公告日：2001-11-28

主分类号：C12N15/11

申请/专利权人:诺维信公司

发明/设计人:杰斯珀·文德

主申请人地址:丹麦鲍斯韦

专利代理机构:柳沈知识产权律师事务所

代理人:巫肖南

国别省市代码:丹麦;DK

权利要求：

权利要求书1．一种在丝状真菌细胞内构建和挑选或筛选目的多核苷酸序列文库的方法，该方法包括：(a)用DNA载体群转化所述真菌细胞，其中每种载体包括：(ⅰ)编码真菌筛选标记和真菌复制起始序列的多核苷酸序列，其中所述标记和复制起始序列在该群体中不变化；和(ⅱ)目的多核苷酸序列，其中所述DNA载体群包含该多核苷酸序列的一种以上变异体；(b)在选择压力下培养所述细胞；(c)挑选或筛选一个或多个表达目的特征的转化株；和(d)分离所述目的转化株。