基因克隆的新方法
本发明涉及用于分离膜结合蛋白的编码基因的方法,其以将一种功能性蛋白与一种融合蛋白本身相融合为特征,而且与现有的在融合蛋白中载有被抗体识别的表位的TMT方法不同。该方法使选择性分离膜结合蛋白的编码基因成为可能。
发明专利
CN99808906.0
1999-04-30
CN1310758
2001-08-29
C12N15/10
中外制药株式会社
土屋政幸;齐藤干良;大友俊彦
日本东京都
柳沈知识产权律师事务所
巫肖南
日本;JP
权利要求书1.用于分离膜结合蛋白的编码基因的方法,所述的方法包括如下步骤:(ⅰ)将包括编码对一种抗原具有结合亲和力的可分泌性功能蛋白的DNA以及连接于该功能蛋白编码DNA3’侧下游的cDNA的载体引入细胞,(ⅱ)在细胞内表达对抗原具有结合亲和力的可分泌性功能蛋白与由该cDNA所编码蛋白的融合蛋白,(ⅲ)通过将在细胞膜上表达融合蛋白的细胞与抗原相接触,筛选结合抗原的细胞,并且(ⅳ)从所筛选的细胞中分离插入到载体中的cDNA。