在单端孢菌毒素缺陷的丝状真菌突变细胞中生产异源多肽的方法
本发明涉及制备多肽的方法,包括:(a)在有利于多肽产生的条件下培养亲本丝状真菌细胞的突变体,其中(ⅰ)该突变体包含编码所述多肽的第一核酸序列和含有对至少一个参与产生单端孢菌毒素之基因的修饰的第二核酸序列,(ⅱ)培养在相同条件下时,该突变体产生的单端孢菌毒素少于亲本丝状真菌细胞;和(b)从培养基中分离所述多肽。本发明还涉及丝状真菌细胞的突变体以及获得突变细胞的方法。本发明又涉及分离的trichodiene合成酶及编码该酶的分离的核酸序列。本发明另外涉及包含所述核酸序列的核酸构建体、载体和宿主细胞,以及制备trichodiene合成酶的方法。本发明最后涉及包含对基因进行了无标记修饰的突变细胞以及获得和利用这样的突变细胞的方法。
发明专利
CN99808112.4
1999-05-20
CN1309711
2001-08-22
C12N15/80
诺沃诺尔迪斯克生物技术有限公司
J·C·罗耶;L·M·克里斯琴森;G·A·甘贝塔;H·布鲁迪;S·M·奥塔尼;W·T·约德
美国加利福尼亚
中国国际贸易促进委员会专利商标事务所
黄革生
美国;US
权利要求书1.一种制备多肽的方法,包括:(a)在有利于多肽产生的条件下培养亲本丝状真菌细胞的突变体,其中(ⅰ)该突变体包含编码所述多肽的第一核酸序列和含有对至少一个参与产生单端孢菌毒素之基因的修饰的第二核酸序列,(ⅱ)培养在相同条件下时,该突变体产生的单端孢菌毒素少于亲本丝状真菌细胞;和(b)从培养基中分离所述多肽。