通过改变基因拷贝数制备多肽的方法

摘要：

本发明涉及制备多肽的方法，包括(a)在有助于多肽生产的条件下培养突变细胞，其中(ⅰ)通过将一个核酸构建体在核酸序列之内的基因座或在核酸序列之外的基因座处导入亲本细胞的基因组，使突变细胞与亲本细胞相关联，该亲本细胞含有编码多肽的核酸序列之至少两个串联的拷贝，或一个编码多肽的核酸序列，该核酸序列在核酸序列之5’和3’端含有重复序列，其中于基因座中导入核酸构建体改变了核酸序列的拷贝数，且拷贝数的改变不是选择压力的结果；(ⅱ)当在同一条件下培养亲本细胞和突变细胞时，突变细胞比亲本细胞产生更多或更少的多肽；(b)从培养液中回收多肽。本发明还涉及获得突变细胞的方法以及突变细胞。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN99808098.5

申请日期：1999-05-27

公开/公告号：CN1307642

公开/公告日：2001-08-08

主分类号：C12N15/67

申请/专利权人:诺沃诺尔迪斯克生物技术有限公司

发明/设计人:D·S·耶弗

主申请人地址:美国加利福尼亚

专利代理机构:中国国际贸易促进委员会专利商标事务所

代理人:樊卫民

国别省市代码:美国;US

权利要求：

权利要求书1．一种用于制备多肽的方法，包括：(a)在有助于多肽生产的条件下培养突变细胞，其中：(ⅰ)通过将一个核酸构建体在核酸序列的拷贝之外的基因座处导入亲本细胞的基因组产生突变细胞，使突变细胞与亲本细胞相关联，该亲本细胞含有编码多肽的核酸序列之至少两个串联的拷贝，其中于基因座中导入核酸构建体改变了核酸序列的拷贝数，且拷贝数的改变不是选择压力的结果；(ⅱ)当在同一有助于多肽生产的条件下培养亲本细胞和突变细胞时，突变细胞比亲本细胞产生更多或更少的多肽；(b)从培养液中回收多肽。