在酵母中制备目的多肽的方法

摘要：

本发明描述了在酵母中制备目的多肽的方法。目的产物以通过单碱性氨基酸加工位点连接的前导序列结合多肽形式表达。在体内或体外通过酶促切割，将目的多肽与前导序列裂解开。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN99802280.2

申请日期：1999-01-22

公开/公告号：CN1302333

公开/公告日：2001-07-04

主分类号：C12N15/81

申请/专利权人:诺沃挪第克公司

发明/设计人:J·布兰德特;K·瓦德

主申请人地址:丹麦鲍斯韦

专利代理机构:中国国际贸易促进委员会专利商标事务所

代理人:黄革生

国别省市代码:丹麦;DK

权利要求：

权利要求书1．通过于合适培养基中培养含有能表达下式序列的表达载体的酵母株，在酵母中制备目的多肽的方法，SP-LP-Xn-PS-*多肽*其中SP是信号肽；LP是天然α-因子前导肽或与其至少85％同源的前导肽；PS是单碱性氨基酸加工位点Lys或Arg；X是含n个氨基酸的间隔肽；n是0或1-10的整数；并且“多肽”是目的多肽；条件是间隔肽X不是Ile-Glu-Gly、Leu-Pro、Lys-Lys-Leu-Ile-Asp、Ile-Asp或Pro-Gly-Asp-Pro，进一步的条件是间隔肽X不含KEX2切割位点，并且不与PS或LP一起构成KEX2切割位点，且当n=0时，前导肽C-末端不是Lys、Arg、Ile-Glu-G1y、Leu-Pro、Lys-Lys-Leu-Ile-Asp、Ile-Asp或Pro-Gly-Asp-Pro，从而前导序列结合的目的多肽在体内穿越细胞膜期间或分泌至培养基中后于体外在加工位点PS处被切割，由此分离目的多肽。