一种由酵母菌(Pichia pastoris)制备人体血清白蛋白的方法

摘要：

一种由酵母菌（ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）制备人体血清白蛋白的方法，是重组基因生物工程技术领域中通过酵母菌发酵制备人体血清白蛋白的方法之一。首先把改进的分泌信号基因和其它四种基因，用基因处理方法得到基因组合质粒，其次培养出一种不含或含极少量空隙蛋白酶的酵母菌，并取其甲醇应用表型为Ｍｕｔ^s菌种发酵制备人体血清白蛋白溶液，最后通过过滤等提纯方法获得产量高杂质少的人体血清白蛋白。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN99126781.8

申请日期：1999-12-07

公开/公告号：CN1298949

公开/公告日：2001-06-13

主分类号：C12P21/00

申请/专利权人:刘宏宇

发明/设计人:刘宏宇;谢岩生

主申请人地址:130021吉林省长春市工农大路60号湖光小区7栋1单元502

专利代理机构:中国科学院长春专利事务所

代理人:刘树清

国别省市代码:吉林;22

权利要求：

1.一种由酵母菌(Pichia&#160;pastoris)制备人体血清白蛋白的方法，是通过培养酵母菌溶液实现的，其特征在于首先应用一段改进了的分泌信号基因和其他四段基因组成一个基因表达盒子，采用标准基因处理方法将其放入pPIC9基因媒介体中，得到一种由酵母菌(Pichiapastoris)表达人体血清白蛋白的基因组合质粒(或称基因媒介体)pPIC9/sHSA，其次培养出一种不含或含极少量空隙蛋白酶的酵母菌HX4/pPIC9/sHSA品种(Pichia&#160;pastoris中的一种)，再次取酵母菌HX4/pPIC9/sHSA的甲醇应用表型为Mut<superscript>s</superscript>菌种，采用发酵方法制备人体血清白蛋白溶液，最后将上述方法制备的人体血清白蛋白发酵溶液，用切向流过滤，活性炭过滤，正离子交换液相色谱，酒精沉淀提纯，制备出产量高杂质少的人体血清白蛋白。