在转基因苜蓿植株中的蛋白生产

摘要：

本发明涉及特征鉴定适用于生产功能性转基因蛋白的宿主系统；所述功能性转基因蛋白用于需要政府管理批准的应用，诸如抗人IgG。众所周知；管理机构要求用于生产转基因蛋白的主细胞库和主细胞系是稳定和持久的，以确保足够的材料用于合适的特征鉴定、临床试验和潜在的销售。目前的植物生产系统需要建立用于此目的的种子库。然而；有许多缺点与用于生产持续可靠的转基因蛋白源的这种系统相关。本发明的一方面涉及特征鉴定适用于符合严格管理要求的转基因蛋白的植物生产系统。本发明的另一方面例举了通过在转基因苜蓿植株中表达相应的基因，生产和特征鉴定用作血清试剂的抗人IgG。将人IgG特异性IgG2a（κ）鼠mAb（C5—1）的重链和轻链的cDNA通过农杆菌感染转移入苜蓿中。获得了表达编码轻链和重链的mRNA的转基因植株，发现来自F1子代（通过有性杂交获得的）的植株表达完全装配的C5—1。此外，所述转基因蛋白在体内以及在提取和纯化步骤期间是稳定的。纯化产生独特的H2L2形式，在标准化血清学试验中其反应性不可与杂交瘤衍生C5—1的反应性区分。结果表明，植物衍生的转基因蛋白诸如mAb可以与杂交瘤衍生的mAb一样有效地用作诊断试剂，并且证明转化的苜蓿系统生产大量蛋白（包括诸如mAb的多体蛋白）的有用性。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN98812925.6

申请日期：1998-11-10

公开/公告号：CN1290302

公开/公告日：2001-04-04

主分类号：C12N15/82

申请/专利权人:加拿大农业及农业食品部%赫马－魁北克公司%加拿大血液服务公司%拉瓦尔大学

发明/设计人:L·P·维兹纳;S·拉伯格;R·巴津;H·克豪迪;R·莱米乌克斯;G·阿拉德

主申请人地址:加拿大魁北克省

专利代理机构:中国专利代理(香港)有限公司

代理人:谭明胜

国别省市代码:加拿大;CA

权利要求：

权利要求书1．用于血清学测定的蛋白的生产方法，包括：用编码所述蛋白的目的基因转化苜蓿植株，选择表达所述蛋白的转化的苜蓿植株，并且从所述转化的苜蓿植株中提取所述蛋白。