用于测序的改变的热稳定DNA聚合酶

摘要：

提供了掺入非常规核苷酸例如用荧光素族染料标记的核苷酸的效率增强的修饰的热稳定的ＤＮＡ聚合酶。这种修饰的热稳定的ＤＮＡ聚合酶是采用重组ＤＮＡ技术制备的。所述聚合酶特别适用于链终止核酸测序方法。还提供了编码本发明重组热稳定聚合酶的核酸以及含有所述核酸的载体和宿主细胞。也提供了含有本发明重组热稳定聚合酶的试剂盒。本发明的聚合酶和方法在对ＤＮＡ测序具有成本显著降低和效率提高的优点。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN98124526.9

申请日期：1998-09-11

公开/公告号：CN1218832

公开/公告日：1999-06-09

主分类号：C12N9/12

申请/专利权人:霍夫曼—拉罗奇有限公司

发明/设计人:戴维·H·盖尔芬德; 莉萨·V·卡尔曼; 托马斯·W·迈尔斯; 弗雷德·L·赖克特;克里斯托弗·L·西古阿

主申请人地址:瑞士巴塞尔

专利代理机构:柳沈知识产权律师事务所

代理人:黄益芬

国别省市代码:瑞士;CH

权利要求：

1．重组的热稳定DNA聚合酶，其特征在于：a)所述聚合酶的天然形式包括氨基酸序列LeuSerXaaXaaLeuXaaXaaProXaaXaaGlu（SEQ ID NO ：1），其中在该序列的3，4，6，9和10位的“Xaa”是任何的氨基酸残基，和在该序列的第7位的“Xaa”是Val和Ile。b)与所述天然序列相比，第4位所述的“Xaa”被突变，但第4位的“Xaa”不突变为Glu；和c)与所述聚合酶的天然形式相比，所述热稳定聚合酶降低了对掺入荧光素族染料标记的核苷酸的辨别力大小。