纤维素酶变体
一种通过氨基酸的取代、缺失或插入来改进纤维素分解酶性质的方法,该方法包括下列步骤:$a构建至少两个氨基酸序列的多重对比,所述序列已知具有与来自Humicolainsolens的内切葡聚糖酶V(EGV)类似的三维结构,该结构从蛋白质数据库4ENG项可知;$b以EGV结构为基础,构建该纤维素分解酶的基于同源性的三维结构;$c识别距离底物结合裂隙不超过5A的氨基酸残基位置;$d识别酶的暴露于表面的氨基酸残基;$e识别酶的所有带电或可能带电的氨基酸残基位置;$f选择一个或多个位置,在所述位置处氨基酸残基将被取代、缺失或将插入氨基酸残基;$g用常规的蛋白质工程技术进行取代、缺失或插入;$和由该方法得到的纤维素酶变体。
发明专利
CN97197983.9
1997-09-17
CN1230987
1999-10-06
C12N9/42
诺沃挪第克公司
K·V·安德森; M·舒雷恩; L·克里斯丁森; B·达姆加德; C·范德奥斯坦
丹麦鲍斯韦
中国国际贸易促进委员会专利商标事务所
黄革生
丹麦;DK
含有表现出纤维素分解活性的催化性核心结构域的酶变体,该变体通过氨基酸残基的取代、插入或缺失或者它们的任意组合而得自一种天然存在的母体纤维素酶,并且-在5位(纤维素酶编号方式)具有丙氨酸残基(A)、丝氨酸残基(S)或苏氨酸残基(T);-在8位(纤维素酶编号方式)具有苯丙氨酸残基(F)或酪氨酸残基(Y);一在9位(纤维素酶编号方式)具有苯丙氨酸残基(F)、色氨酸残基(W)或酪氨酸残基(Y);-在10位(纤维素酶编号方式)具有天冬氨酸残基(D);-在121位(纤维素酶编号方式)具有天冬氨酸残基(D)。