甲醇毕赤酵母营养突变体的制备

摘要：

本发明公开了制备具有营养缺陷型突变的甲醇毕赤酵母细胞的方法，该方法包含步骤：（a)暴露甲醇毕赤酵母细胞于诱变条件下；(b)在丰富培养基中培养得自步骤（a）的细胞，从而使得突变在至少一部分细胞中得到建立和复制；（c）在可同化的氮不足的培养基中培养得自步骤（b）的细胞，从而耗尽细胞的氮储备；（d）在确定成分培养基中培养得自步骤（c）的细胞，以选择营养基因缺损的细胞，其中的培养基包含无机氮源和足以杀死生长甲醇毕赤酵母细胞的量的制霉菌素；（e）在丰富培养基中培养得自步骤（d）的选择的细胞。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN97197503.5

申请日期：1997-07-14

公开/公告号：CN1238806

公开/公告日：1999-12-15

主分类号：C12N15/81

申请/专利权人:津莫吉尼蒂克斯公司

发明/设计人:C·K·雷蒙德

主申请人地址:美国华盛顿

专利代理机构:中国国际贸易促进委员会专利商标事务所

代理人:李瑛

国别省市代码:美国;US

权利要求：

1．一种制备具有营养缺陷型突变的甲醇毕赤酵母细胞的方法，该方法包含：（a）暴露甲醇毕赤酵母细胞于诱变条件下；（b）在丰富培养基中培养得自步骤（a）的细胞，从而使得突变在至少一部分细胞中得到建立和复制；（ c）在可同化的氮不足的培养基中培养得自步骤（b）的细胞，从而耗尽细胞的氮储备；（d）在确定成分培养基中培养得自步骤（c）的细胞，以选择营养基固缺损的细胞，其中的培养基包含无机氮源和足以杀死生长甲醇毕赤酵母细胞的量的制霉菌素；（e）在丰富培养基中培养得自步骤（d）的选择的细胞。