拟南芥中的质体转化

摘要：

本发明提供获得转质体基因组拟南芥属植物和芸苔属植物的方法与组合物。具体地说，本方法提供有助于导入外源有益ＤＮＡ分子后转化植株再生的培养方案和组合物。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN97194333.8

申请日期：1997-03-06

公开/公告号：CN1222934

公开/公告日：1999-07-14

主分类号：C12N15/00

申请/专利权人:拉杰斯大学

发明/设计人:P·马利加; S·R·思克达; S·V·雷戴

主申请人地址:美国新泽西州

专利代理机构:中国专利代理(香港)有限公司

代理人:齐曾度

国别省市代码:美国;US

权利要求：

1．获得转质体基因组植株的方法，包括：a)在有刺激均一细胞分裂的试剂存在下培养所述植物的植物细胞；b)将所述植物细胞转至琼脂固化培养基上的滤纸上；c)将转化DNA传递到所述植物细胞的质体基因组中，所述转化DNA分子含有：i）由来自待转化的所述质体基因组的质体DNA序列组成的多个寻靶区段，所述寻靶区段帮助所述转化DNA同源重组入所述质体基因组；ii)来自质体DNA的5’端和3’端调控序列，它操作性第连接到所述寻靶区段中的选择性标记基因上，所述调控序列有助于选择标记基因的表达和所编码mRNA的稳定，所述选择性标记基因赋予对所述植物细胞的抗生素抗性；iii）来自质体DNA的5’端和3’端调控序列，它操作性第连接到编码外源目的基因的序列上，从而有助于外源目的基因的表达及所编码mRNA的稳定；并且iv)用于将所述外源基因邻近所述选择性标记基因插入的至少一个克隆位点，所述插入不干扰所述选择性表型的所述赋予及质体侧翼基因的功能；d)将按步骤（c)的方法转化的细胞以高密度转至培养基上培养预定的时间；所述培养基含有促进均一细胞分裂继续进行和植株再生的试剂；e)将按步骤（d)处理的所述细胞转至含所述再生促进试剂和所述抗生素的琼脂固化培养基中，所述转化细胞通过所述选择性标记基因的表达被赋予对所述抗生素的抗性；并且f)选择具转化质体基因组的细胞并从中诱导植株再生。