双链构象多态性分析

摘要：

双链构象多态性分析是通过将一个包括交联剂和任选的标记在内的探针和具有靶序列的样品结合，而该靶序列对探针序列完全互补或有一至几个错配。在温和或较低严格的条件下杂交足够的时间，辐照处理杂交产物以诱导通过交联剂的交联的发生，然后用变性胶电泳分析样品，其迁移率与探针和靶序列的互补程度有关。为进一步确证，在第二个实验中，将探针和样品在（严格）的条件下结合，可见到探针／靶序列间发生错配时形成的交联数量明显少于完全互补时的交联数量。交联后，可用凝胶电泳分离样品，并确定交联的核酸数量。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN96199509.2

申请日期：1996-11-01

公开/公告号：CN1207137

公开/公告日：1999-02-03

主分类号：C12Q1/68

申请/专利权人:纳克斯科公司

发明/设计人:迈克尔·伍德; 鲁埃尔·范阿塔; 戴维·阿尔巴格利

主申请人地址:美国加利福尼亚州

专利代理机构:柳沈知识产权律师事务所

代理人:巫肖南

国别省市代码:美国;US

权利要求：

一种检测核酸探针和靶核酸间至少一个错配的存在与否的方法，其中所说的探针与靶的序列间有不超过五个错配的差异，该探针包括已知序列和光激活交联剂，其中所说的探针序列在与该靶序列的杂交时，该探针序列和靶序列间通过光激活作用形成共价键，所说方法包括：在一杂交介质中，于温和的杂交条件以杂交足够的时间结合探针序列和包括靶序列的核酸样品以使该探针和靶序列杂交；照射其中所说的杂交介质以使该探针和其杂交的靶序列间形成交联以形成交联的双链核酸；通过变性电泳分离杂交介质中的核酸并比较该交联双链核酸和已知的发生错配或互补的交联双链核酸标准品的迁移率，以确定至少一个错配的存在与否。