DNA碱基序列的测序方法及用于该方法的样品调制方法

摘要：

本发明涉及利用由酶进行的ＤＮＡ互补链合成的ＤＮＡ分析方法，用于高效率的ＤＮＡ碱基序列测序方法的样品的调制方法以及用于该方法的试剂盒。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN96112561.6

申请日期：1996-09-18

公开/公告号：CN1153825

公开/公告日：1997-07-09

主分类号：C12Q1/68

申请/专利权人:株式会社日立制作所

发明/设计人:神原秀记; 冈野和宣

主申请人地址:日本东京都

专利代理机构:中国国际贸易促进委员会专利商标事务所

代理人:段承恩

国别省市代码:日本;JP

权利要求：

碱基序列测序方法，其特征在于包括以下工序：（１）将样品ＤＮＡ利用限制性内切酶切断得到ＤＮＡ片段的工序及（２）在ＤＮＡ片段的３’末端上导入具有特定碱基序列的寡核苷酸的工序及（３）将导入了上述寡核苷酸的上述ＤＮＡ的片段的１条链作为模板，使用由与寡核苷酸的碱基序列的至少一部分至补的第１碱基序列部分及与利用上述限制性内切酶识别的碱基序列互补的第２碱基序列部分及、从１个碱基至４个碱基的范围的碱基组合而形成的第３碱基序列部分组成的，并被标记的标记引物，进行互补链合成延伸反应，得到具有与ＤＮＡ片段的１条链互补的碱基序列的标记延伸引物的工序及（４）使（ａ）将上述导入了寡核苷酸的上述ＤＮＡ片段的１条链作为模板，使用上述标记引物进行序列反应的工序及、（ｂ）将具有上述ＤＮＡ片段的１条链的碱基序列及与其邻接的碱基序列的样品ＤＮＡ的１条链的一部分或样品ＤＮＡ的１条链作为模板，使用上述标记延伸引物进行序列反应的工序，分别或同时进行的工序及、（５）将上述序列反应的生成物进行电泳，确定上述ＤＮＡ片段的碱基序列及、与ＤＮＡ片段的碱基序列邻接的样品ＤＮＡ的至少一部分的碱基序列工序。