DNA扩增

摘要：

本发明公开了一种在体内扩增亲本细胞基因组中ＤＮＡ序列Ｂ的方法。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN94109005.1

申请日期：1994-06-22

公开/公告号：CN1114355

公开/公告日：1996-01-03

主分类号：C12N15/10

申请/专利权人:诺沃挪第克公司

发明/设计人:Ｓ·Ｔ·约根森

主申请人地址:丹麦巴格斯瓦尔德

专利代理机构:中国国际贸易促进委员会专利商标事务所

代理人:黄革生

国别省市代码:丹麦;DK

权利要求：

一种在体内扩增亲本细胞基因组中ＤＮＡ序列Ｂ的方法，包括：ａ）将含有Ｃ－Ｍ－Ａ－Ｄ结构的ＤＮＡ构建体整合到所说细胞的基因组中，其中，Ａ表示与侧接或交叠待扩增ＤＮＡ序列Ｂ的基因组ＤＮＡ片段同源的ＤＮＡ序列，或者是与作为ＤＮＡ序列Ｂ构成的所说序列Ｂ的末端之一的基因组ＤＮＡ片段同源的ＤＮＡ序列；Ｃ表示与侧接或交叠待扩增ＤＮＡ序列Ｂ的基因组ＤＮＡ片段同源的ＤＮＡ序列，或者是与作为ＤＮＡ序列Ｂ构成的所说序列Ｂ的末端之一的基因组ＤＮＡ片段同源的ＤＮＡ序列，与序列Ａ相比，序列Ｃ定位于序列Ｂ的相对的末端；Ｄ表示与序列Ｂ相比定位于序列Ｃ远端的基因组ＤＮＡ片段同源的ＤＮＡ序列；Ｍ表示编码选择标志的ＤＮＡ序列，ｂ）选择其中有ＤＮＡ序列Ｍ与序列Ａ一起整合至ＤＮＡ序列Ｂ的上游或下游的基因组中的细胞，该细胞含有任意方向的Ａ－Ｂ－Ｃ－Ｍ－Ａ－Ｄ结构，ｃ）在增加对于由ＤＮＡ序列Ｍ编码的选择标记的选择压力下增殖步骤ｂ）中选择的细胞，得到与亲本细胞相比增加了ＤＮＡ序列Ｂ和Ｍ的基因组整合拷贝数的细胞。