一种从大肠杆菌中制备多核苷酸磷酸化酶的方法

摘要：

本发明为一种单独使用溶菌酶从自选大肠杆菌中提取多核苷酸磷酸化酶的方法，主要过程是将大肠杆菌、溶菌酶溶于缓冲溶液中，水浴温育一定时间后离心分离，上清液经多次提纯分离，得到大量的多核苷酸磷酸化酶。此方法，每１００克菌体可得到１—３万单位的多核苷酸磷酸化酶，重复性好，适合大规模生产。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN94101001.5

申请日期：1994-02-07

公开/公告号：CN1106861

公开/公告日：1995-08-16

主分类号：C12N19/88

申请/专利权人:中国科学院生物物理研究所

发明/设计人:陆传宗; 宋兰芝; 徐秀璋; 严敏官; 候桂珍; 房月华

主申请人地址:100101北京市朝阳区大屯路15号生物物理研究所

专利代理机构:北京科龙专利事务所

代理人:韩小雷

国别省市代码:北京;11

权利要求：

一种从大肠杆菌中制备多核苷酸磷酸化酶的方法，其特征在于将经培养的每１００克大肠杆菌菌体溶于含有１０↑［－２］－１０↑［－４］ＥＤＴＡ的０．０１－０．１ＭＴｒｉｓ－Ｈｃｌ（ＰＨ７－８）的缓冲液中，搅拌下加入０．２５－１ｇ溶菌酶，在０－３９℃恒温水浴下温育３０－６０分钟，在冷冻离心机中，以８０００－１２０００转／分的转速离心２０－６０分钟，上清液经纯化可得到２－３万单位的多核苷酸磷酸化酶。