一种扩增核苷酸顺序的方法

摘要：

本发明提供了一种用于扩增含有未知顺序的接苷酸片段的方法及其药盒，可以快速有效地测定长核苷酸顺序。该方法包括通过切割靶核酸和连接以形成靶核酸片段／小载体单位。其中一个靶核酸片段含有和起始引物杂交的已知顺序的起始引发区，而靶核酸片段／小载体单位含有一个和小载体引物杂交的已知顺序的小载体引发区。本扩增方法通过与靶核酸片段／小载体单位的起始引发区杂交的起始引物的延伸来完成。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN89107031.1

申请日期：1989-07-28

公开/公告号：CN1040220

公开/公告日：1990-03-07

主分类号：C12P19/30

申请/专利权人:帝国化学工业公司

发明/设计人:阿历山大·弗雷德·马卡姆; 约翰·克雷格·史密夫; 拉希达·安瓦

主申请人地址:英国英格兰

专利代理机构:中国专利代理有限公司

代理人:罗宏

国别省市代码:英国;GB

权利要求：

一种通过引物延伸使含有未知顺序的核酸片段进行扩增的方法，其特征在于该方法包括，切割一种靶核酸以得到靶核酸片段，其中一个所述片段含有能和起始引物杂交的已知核苷酸顺序的起始引发区，通过连接从靶核酸片段中制备靶核酸片段／小载体单位，每个单位带有一个和载体引物杂交的已知顺序的载体引发区，并且用合适的三磷酸核苷和三磷酸核苷的聚合剂在杂交条件下，一起或依次处理靶核酸片段／小载体单位，以合成一个互补于一个单链靶核酸／小载体单位的起始引物延伸产物，该单链靶核酸／小载体单位带有一个杂交有起始引物的起始引发区，对该起始引物要进行选择，使它基本上互补于起始引发区，不然，如果没有这种起始引发区，则不能合成互补于单链靶核酸片段／小载体单位的延伸产物。