表达人Ｃ蛋白酶原的载体和化合物

摘要：

描述了一种重组生产人Ｃ蛋白酶原的方法。这些酶原与天然Ｃ蛋白酶原的不同在于，它们对凝血酶和凝血酶／凝血调节蛋白的激活作用更为敏感。还公开了用于该方法的ＤＮＡ化合物、载体和转化体。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN88105199.3

申请日期：1988-12-24

公开/公告号：CN1035526

公开/公告日：1989-09-13

主分类号：C12N15/00

申请/专利权人:伊莱利利公司

发明/设计人:尼尔斯·乌尔里克·班; 赫特穆特·约瑟夫·埃尔里哈; 殷秀慈

主申请人地址:美国印第安纳州

专利代理机构:中国专利代理有限公司

代理人:姜建成% 曹桓兴

国别省市代码:美国;US

权利要求：

一种制备重组DNA载体的方法，该方法包括将以下两个DNA化合物连接在一起：（I）含有一个蛋白编码顺序的DNA化合物，该蛋白从氨基末端到羧基末端含有；a）一个γ－羧基化的分泌蛋白的信号肽和肽原；b）人c蛋白轻链；c）一个选自赖氨酸－精氨酸、精氨酸－赖氨酸、赖氨酸－赖氨酸、或精氨酸－精氨酸的二肽；d）氨基酸残基顺序：ASP THR GLU ASP GLN GLU ASP GLN VALR1 R2 ARG LEU ILE R3 GLY LYS MET THR ARG ARG GLY ASP SER PROTRP GLN VAL VAL LEU LEU ASP SER LYS LYS LYS LEU ALA CYS GLY ALAVAL LEU ILE HIS PRO SER TRP VAI LEU THR ALA HIS CYS MET ASPGLU SER LYS LYS LEU LEU VAL ARG LEU GLY GLU TYR ASP LEU ARG ARGTRP GLU LYS TRP GLU ASP LEU ASP ILE LYS GLU VAL PHE VAL HISPRO ASN TYR SER LYS SER THR THR ASP ASN ASP ILE ALA LEU LEU HISLEU ALA GLN PRO ALA THR LEU SER GLN THR ILE VAL FRO ILE CYS LEUPRO ASP SER GLY LEU ALA GLU ARG GLU LEU ASN GLN ALA GLY GLN GLUTHR LEU VAL THR GLY TRP GLY TYR HI S SER SER ARG GLU LYS GLU ALALYS ARG ASN ARG THR PHE VAL LEU ASN PHE ILE LYS ILE PRO VAL VALPRO HI S ASN GLU CYS SER GLU VAL MET SER ASN MET VAL SER GLU ASNMET LEU CYS ALA GLY ILE LEU GLY ASP ARG GLN ASP ALA CYS GLU GLYASP SER GLY GLY FRO MET VAL ALA SER PHE HIS GLY THR TRP PHE LEUVAL GLY LEU VAL SER TRP GLY GLU GLY CYS GLY LEU LEU HI S ASN TYRGLY VAL TYR THR LYS VAL SER ARG TYR LEU ASP TRP ILE HIS GLY HISILE ARG ASP LYS GLU ALA PRO GLN LYS SER TRP ALA PRO－COOH其中R1为PHE、GLY、TYR、或TRP，R2为VAL或PRO， R3为ASP或ASN， ARG为精氨酸，ASN为天冬酰胺，ASP为天冬氨酸，－COOH为羧基末端，CYS为半胱氨酸，GLN为谷氨酰胺，GLU为谷氨酸，GLY为甘氨酸，HIS为组氨酸，ILE为异亮氨酸，LEU为亮氨酸，LYS为赖氨酸， MET为甲硫氨酸，PHE为苯丙氨酸，PRO为脯氨酸，SER为丝氨酸，THR为苏氨酸，TRP为色氨酸，TYR为酪氨酸，VAL为缬氨酸；（II）含有一个启动子的DNA化合物，该启动子的定位在连接后能够驱动编码顺序的表达