毕赤属酵母基因组选择性定点修饰

摘要：

毕赤属酵母定点修饰基因组的方法和所用的新的ＤＮＡ顺序。用系列排列的线性ＤＮＡ片段转化毕赤。该片段包括第一和第二可插入ＤＮＡ片段，侧部为一个标记基因。可插入的ＤＮＡ序列与毕赤基因组的特定部分是同质的，在定点通过重组整合。得到的转化宿主含标记基因和任何位于可插入ＤＮＡ片段间的附加ＤＮＡ序列。它定点破坏或删去了原有序列。当用醇氧化酶被破坏的宿主时，将加强异质基因的表达。毕赤的第一醇氧化酶基因破坏时，发现还存在第二醇氧化酶基因。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN86107108

申请日期：1986-10-24

公开/公告号：CN86107108

公开/公告日：1987-06-03

主分类号：C12N15/00

申请/专利权人:菲利普石油公司

发明/设计人:詹姆斯·迈克尔·克里格

主申请人地址:美国俄亥克拉何马州

专利代理机构:中国国际贸易促进委员会专利代理部

代理人:辛敏忠% 顾柏棣

国别省市代码:美国;US

权利要求：

毕赤属酵母定点选择性修饰基因组的方法，修饰是在预先决定的基因组内定点进行的，其方法包括用系列排列的线性ＤＮＡ片段转化毕赤属宿主菌株，该片段包括：　　一个第一插入的ＤＮＡ片段，　　一个可选择的标记基因，和　　一个第二可插入的ＤＮＡ片段，　　其中所说第一和第二可插入ＤＮＡ片段均是一个至少约２００个核苷酸片段，它具有与原来的毕赤各种基因组发生修饰的位点的个别部分同质的核苷酸序列；其中所说的第一和第二可插入ＤＮＡ片段在直线ＤＮＡ片段中是一个接一个与原来在毕赤基因组同样的方向排列的；和其中所说的标记基因位于第一和第二可插入ＤＮＡ片段之间。