PRKAA1基因作为绵羊饲料转化率相关的分子标记及其应用
本发明提供了PRKAA1基因作为绵羊饲料转化率相关的分子标记及其应用，其分子标记根据PRKAA1基因序列设计引物，从绵羊血液中提取DNA，通过PCR扩增、DNA测序和序列分析，发现在扩增片段的第165位存在一个C/T多态性位点，进一步使用KASPar引物对935只湖羊的多态性位点进行检测和建立最小二乘模型，对基因型与饲料转化率进行关联分析，最终确定了本发明扩增的PRKAA1基因片段可以作为与绵羊饲料转化率相关的分子标记。本发明的分子标记可用于节粮型优质肉羊的培育，为绵羊饲料转化率的遗传改良提供了基因工程手段，具有重大的实际应用价值。
发明专利
CN202410672791.6
2024-05-27
CN118345179A
2024-07-15
C12Q1/6888(2018.01)
金川集团股份有限公司
高飞;王维民;李成海;蒲萌茹;王立忠;刘金睿;赵家辉;康彩彦;张德印;田慧彬;赵源;廉江汀;李发弟
737103 甘肃省金昌市金川区北京路
兰州塞维思知识产权代理事务所(普通合伙)
刘志松%刘树涛
甘肃;62
1.PRKAA1基因作为绵羊饲料转化率相关的分子标记，其特征在于，所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其第165位的Y表示C或T，由于上述序列在第165位碱基处有一个C/T突变，从而导致了绵羊PRKAA1基因在该位点的C/T多态性。 2.一种用于检测权利要求1所述的分子标记的PCR引物对，其特征在于，其包括正向引物和反向引物，其中，正向引物的序列如SEQ ID NO.2所示，反向引物的序列如SEQ ID NO.3所示。 3.一种用于检测权利要求1所述的分子标记的KASPar引物对，其特征在于，其包括正向引物A1和正向引物A2和通用反向引物C，用于检测AlleleA的正向引物A1的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，用于检测AlleleG的正向引物A2的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，通用反向引物C的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。 4.一种用于检测权利要求1所述的分子标记的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包含了权利要求2所述的PCR引物对或权利要求3所述的KASPar引物对。 5.一种检测权利要求1所述的分子标记的方法，其特征在于，其包括如下步骤： a) 采用权利要求 2 或 3 所述的引物对，或者使用权利要求4所述的试剂盒，对绵羊基因组DNA进行扩增； b) 对步骤a)获得的扩增产物的多态性位点进行鉴定。 6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，多态性位点的鉴定采用直接测序法、荧光探针法、基因芯片法、高分辨率溶解曲线法。 7.根据权利要求 5 所述的方法，其特征在于，利用权利要求 3 所述的 KASPar 引物对进行 PCR 扩增，扩增结束后，利用BMG PHERAstar仪器检测荧光信号并查看分型结果。 8.权利要求2所述的PCR引物对、权利要求3所述的KASPar引物对或权利要求4所述的试剂盒，或权利要求5-7中任一项所述的方法在绵羊饲料转化率检测中的应用。 9.权利要求2或3所述的引物对，或权利要求4所述的试剂盒，或权利要求5-7任一项所述的方法在绵羊育种中的应用，其特征在于，所述育种为培育节粮型绵羊。