SlCHP16基因及其超量表达载体在番茄种植中的应用

摘要：

本发明涉及基因工程技术领域，具体公开了SlCHP16基因及其超量表达载体在番茄种植中的应用，所述SlCHP16基因的cDNA序列如SEQ ID No.1所示，利用所述SlCHP16基因构建超量表达载体转化番茄植株后能够显著促进番茄根系生长，显著增强番茄的盐碱胁迫抗性。本发明提供的SlCHP16基因构建超量表达载体有利于促进了番茄根系生长，增强番茄的盐碱胁迫抗性。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202410610573.X

申请日期：2024-05-15

公开/公告号：CN118440977A

公开/公告日：2024-08-05

主分类号：C12N15/82(2006.01)

申请/专利权人:西北农林科技大学

发明/设计人:李国斌;胡晓辉;康珍;李建明;潘佳琪;陈果;孙玚;李政伦

主申请人地址:712100 陕西省咸阳市杨凌示范区邰城路3号

专利代理机构:西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙)

代理人:崔瑞迎

国别省市代码:陕西;61

权利要求：

1.SlCHP16基因在番茄种植中的应用，其特征在于，所述SlCHP16基因的cDNA序列如SEQID No.1所示，利用所述SlCHP16基因构建超量表达载体转化番茄植株后促进番茄根系生长，增强番茄的盐碱胁迫抗性。 2.SlCHP16基因的超量表达载体，其特征在于，所述超量表达载体为权利要求1中所述的超量表达载体，通过将SlCHP16基因片段与pHellsgate8载体连接构建获得。 3.权利要求2所述的SlCHP16基因的超量表达载体的构建方法，其特征在于，包括如下步骤： 以番茄cDNA为模板，以SEQ ID No.2-3所示的序列为引物扩增获得SlCHP16基因片段； 使用同源重组酶ExnaseII将获得的SlCHP16基因片段和线性化pHellsgate8载体进行重组连接，获得重组载体，即超量表达载体。 4.根据权利要求3所述的SlCHP16基因的超量表达载体的构建方法，其特征在于，PCR扩增时的反应体系为：Phanta Max Super-Fidelity DNA Polymerase1μL；2×Phanta MaxBuffer 25μL；正向引物2μL；反向引物2μL；DNA模板1μL；dNTP Mix 1μL；ddH2O up to 50μL。 5.一种利用权利要求2所述的SlCHP16基因的超量表达载体促进番茄根系发育并提高盐碱胁迫耐受性的方法，其特征在于，包括如下步骤： 克隆番茄中的SlCHP16基因，构建超量表达载体，转化农杆菌后利用农杆菌侵染转入番茄，培养得到SlCHP16超量表达的T0转基因植株，选择单株进行自交，获得T1代转基因植株； 所述的T1代转基因植株幼苗的初生根生长速度增加，根尖细胞长度增加，根系生长加快，耐盐抗性增强。 6.含有权利要求2所述的超量表达载体的菌液，其特征在于，由超量表达载体转化感受态细胞获得。 7.根据权利要求6所述的超量表达载体的菌液，其特征在于，所述感受态细胞为农杆菌。 8.根据权利要求6所述的超量表达载体的菌液，其特征在于，所述菌液由LB液体培养基培养转化后的农杆菌获得。 9.权利要求2所述的SlCHP16基因的超量表达载体或权利要求6所述的菌液在番茄种植中的应用，其特征在于，利用SlCHP16基因的超量表达载体转化农杆菌后浸染番茄植物获得转基因番茄植物，获得的转基因番茄植物根系总长度和根系总表面积均增加。 10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，超量表达载体转化番茄植物获得的转基因番茄植物的盐碱胁迫抗性增强。