RNA甲基化检测组合物及其在白血病诊断中的应用

引用

摘要：

本发明提供了一种RNA甲基化检测组合物，包括：1)第一扩增引物对，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO：5和6所示；第一阻断引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO：11所示；2)第二扩增引物对，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO：8和9所示；第二阻断引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO：12所示，其中所述第一阻断引物和所述第二阻断引物的3’端核苷酸为经修饰核苷酸，以便阻止DNA聚合酶以所述第一阻断引物或所述第二阻断引物为引物进行引物延伸。本发明还提供了上述RNA甲基化检测组合物在诊断和筛选急性髓系白血病(AML)中的应用。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202410572291.5

申请日期：2024-05-08

公开/公告号：CN118421795A

公开/公告日：2024-08-01

主分类号：C12Q1/6886(2018.01)

申请/专利权人:湛江中心人民医院

发明/设计人:李松谕;刘雅;杨志刚;张幸;黎光儒;吴旻晖;贾志荣

主申请人地址:524033 广东省湛江市赤坎区源珠路236号

专利代理机构:北京聚力顺为知识产权代理事务所(普通合伙)

代理人:张学府

国别省市代码:广东;44

权利要求：

1.RNA甲基化检测组合物，包括： 1)第一扩增引物对，其核苷酸序列分别如SEQIDNO：5和6所示；第一阻断引物，其核苷酸序列如SEQIDNO：11所示； 2)第二扩增引物对，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO：8和9所示；第二阻断引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO：12所示，其中所述第一阻断引物和所述第二阻断引物的3’端核苷酸为经修饰核苷酸，以便阻止DNA聚合酶以所述第一阻断引物或所述第二阻断引物为引物进行引物延伸。 2.如权利要求1所述的RNA甲基化检测组合物，其中还包括第一荧光探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示；第二荧光探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO：10所示。 3.如权利要求1所述的RNA甲基化检测组合物，其中所述经修饰核苷酸为3’-OH被Spacer C3修饰的核苷酸。 4.如权利要求2所述的RNA甲基化检测组合物，其中所述第一荧光探针和第二荧光探针均为Taqman探针。 5.如权利要求4所述的RNA甲基化检测组合物，其中所述第一荧光探针和第二荧光探针的5’端连接有不同的荧光基团。 6.如权利要求5所述的RNA甲基化检测组合物，其中所述第一荧光探针在5’端连接有荧光基团TEXAS RED，3’端连接有荧光淬灭基团BHQ2；所述第二荧光探针在5’端连接为荧光基团FAM，3’端连接有荧光淬灭基团BHQ2。 7.如权利要求1所述的RNA甲基化检测组合物，其中所述RNA为mRNA。 8.权利要求1-7任一项所述的RNA甲基化检测组合物在制备用于诊断急性髓系白血病的诊断试剂盒中的应用。

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