PCSK9基因重组AAV载体、高脂血症动物模型的构建方法和应用
本发明提供了一种PCSK9基因重组AAV载体、高脂血症动物模型的构建方法和应用，涉及生物医药技术领域。该PCSK9基因重组AAV载体为携带PCSK9基因的嵌合型AAV8载体，该嵌合型AAV8载体经衣壳蛋白修饰，包括AAV8的磷脂酶A2结构域替换为AAV2型。该高脂血症动物模型的构建方法通过PCSK9基因重组AAV高效靶向转导肝脏组织，并使PCSK9基因长期稳定表达，使动物模型形成显著的高胆固醇血症和高甘油三酯血症表型，制备得到高脂血症动物模型，具有经济、稳定、便捷、高效的优点，和良好的应用前景和转化价值。
发明专利
CN202410568295.6
2024-05-08
CN118325969A
2024-07-11
C12N15/864(2006.01)
新疆医科大学第一附属医院
陈邦党;陈小翠
830000 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市高新区(新市区)鲤鱼山南路137号
北京超凡宏宇知识产权代理有限公司
邓慧
新疆;65
1.嵌合型AAV8载体，其特征在于，所述嵌合型AAV8载体为AAV8经衣壳蛋白修饰而得，所述衣壳蛋白修饰包括将AAV8衣壳蛋白VP1上的磷脂酶A2结构域替换为AAV2的磷脂酶A2结构域。 2.根据权利要求1所述的嵌合型AAV8载体，其特征在于，所述嵌合型AAV8载体携带外源基因； 可选地，所述外源基因由CBA启动子驱动表达。 3.PCSK9基因重组AAV载体，其特征在于，为携带PCSK9基因的权利要求1或2所述的嵌合型AAV8载体。 4.根据权利要求3所述的PCSK9基因重组AAV载体，其特征在于，所述PCSK9基因为人源PCSK9基因； 可选地，人源PCSK9基因的核苷酸序列为Seq ID NO.3所示的序列。 5.高脂血症动物模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括将权利要求3或4所述的PCSK9基因重组AAV载体导入受试动物。 6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述受试动物是野生型； 可选地，所述受试动物包括哺乳动物； 可选地，所述PCSK9基因重组AAV载体经静脉注射导入受试动物； 可选地，所述PCSK9基因重组AAV载体经1次静脉注射导入受试动物。 7.根据权利要求6所述的构建方法，其特征在于，所述受试动物包括小鼠； 可选地，PCSK9基因重组AAV载体的导入剂量为2×1011vg。 8.根据权利要求5～7任一项所述的构建方法，其特征在于，所述高脂血症包括血清总胆固醇和甘油三酯水平升高； 可选地，所述高脂血症包括血清总胆固醇和甘油三酯中血浆脂蛋白乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、中密度脂蛋白和高密度脂蛋白升高。 9.权利要求1或2所述的嵌合型AAV8载体，或权利要求3或4所述的PCSK9基因重组AAV载体，或权利要求5～8任一项所述的高脂血症动物模型的构建方法在如下任一项中的应用： (I)筛选或制备用于预防或治疗高脂血症的药物中的应用； (II)筛选或制备用于预防或治疗动脉粥样硬化的药物中的应用； (III)筛选或制备药物，所述药物用于降低血液中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平中至少一种。 10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，(Ⅰ)～(Ⅲ)中任一项的药物分别独立的以PCSK9、低密度脂蛋白受体和载脂蛋白ApoB-100中的至少一种为干预靶标。