OsSERK4蛋白及其编码基因在调控植物对水稻草状矮化病毒抗性中的应用
本发明公开了OsSERK4蛋白及其编码基因在调控植物对水稻草状矮化病毒抗性中的应用，本方案OsSERK4蛋白的氨基酸序列为序列表SEQ ID.2所示；本方案经实验证明，OsSERK4蛋白过量积累的水稻更容易感病，而通过CRISPR/Cas9途径将OsSERK4敲除的转基因水稻对RGSV的抗性增强。
发明专利
CN202410356177.9
2024-03-26
CN118421681A
2024-08-01
C12N15/82(2006.01)
福建农林大学
吴建国;赵珊珊;吴元圣
350000 福建省福州市仓山区上下店路15号
厦门原创专利事务所(普通合伙)
雷鹏达
福建;35
1.OsSERK4蛋白或其编码基因或包含该基因的载体的应用，其特征在于，其为如下a1)或a2)： a1)调控植物对水稻草状矮化病毒的抗性； a2)选育对水稻草状矮化病毒引发的病毒病害抗性增强的植物品种； 其中，所述OsSERK4蛋白为如下b1)或b2)所述的蛋白： b1)具有序列表SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的蛋白； b2)包括与序列表SEQ ID NO:2所示氨基酸序列具有95％以上或98％以上或99％的同一性，且具有调控植物对水稻草状矮化病毒抗性的蛋白； 所述OsSERK4蛋白的编码基因为如下d1)或d2)或d3)所述的基因： d1)具有序列表SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的DNA分子； d2)编码具有序列表SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列对应蛋白的DNA分子； d3)编码的蛋白对应的氨基酸序列与序列表SEQ ID NO:2所示氨基酸序列具有95％以上或98％以上或99％的同一性，且编码的蛋白具有调控植物对水稻草状矮化病毒抗性的基因。 2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：b2)中的蛋白为通过置换、取代、附加或缺失序列表SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的一个或多个氨基酸来获得。 3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的植物为单子叶植物或双子叶植物。 4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的植物为水稻； 所述载体为OsSERK4蛋白的编码基因的CRISPR/Cas9载体，其用于敲除OsSERK4蛋白的编码基因。 5.一种靶向敲除OsSERK4蛋白的编码基因的sgRNA，其特征在于，其为序列表SEQ IDNO:3所示的20bp靶标序列。 6.一种用于敲除OsSERK4蛋白的编码基因的载体，其特征在于，其为CRISPR/Cas9载体，其含有权利要求5所述sgRNA的20bp靶标序列。 7.一种调控植物对水稻草状矮化病毒抗性的方法，其特征在于，包括： 将OsSERK4蛋白的编码基因导入目的植物中，得到转基因植物，所得转基因植物的水稻草状矮化病抗性低于所述目的植物； 或者，将用于敲除OsSERK4蛋白的编码基因的载体转入目的植物中，得到敲除OsSERK4蛋白的编码基因的转基因植物，所得转基因植物的水稻矮缩病抗性高于所述目的植物； 其中，所述OsSERK4蛋白为如下b1)或b2)所述的蛋白： b1)具有序列表SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的蛋白； b2)包括与序列表SEQ ID NO:2所示氨基酸序列具有95％以上或98％以上或99％的同一性，且具有调控植物对水稻草状矮化病毒抗性的蛋白； 所述载体为CRISPR/Cas9载体，其含有权利要求5所述sgRNA的20bp靶标序列。 8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述水稻矮缩病的病原为水稻矮缩病毒RiceGrassy Stunt Virus。 9.如权利要求7或8所述的方法，其特征在于，OsSERK4蛋白的编码基因通过重组载体导入目的植物； 所述重组载体为将蛋白OsSERK4的编码基因插入表达载体中得到的重组载体。 10.如权利要求7或8所述的方法，其特征在于，所述用于敲除OsSERK4蛋白的编码基因的载体为将OsSERK4蛋白的基因以特异性靶标序列插入表达载体中得到的CRISPR/Cas9载体。