4-羟基苯乙酸-3-羟化酶突变体及其应用

摘要：

本发明公开了4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶突变体及其应用，4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶突变体为下列之一：SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第63位谷氨酸突变为丝氨酸；SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第478位天冬酰胺突变为丝氨酸；本发明的两个基因工程菌发酵生产丹参素的产量与野生型4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶的工程菌比，分别提高了42.46％和71.64％，分别达到715.24mg/L和861.66mg/L。本发明突破了4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶对4‑羟基苯乳酸底物特异性差、催化效率低的限制，显著提高了大肠杆菌生产丹参素的产率。本发明催化效率高，工艺简单，绿色环保。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202410280847.3

申请日期：2024-03-11

公开/公告号：CN118421574A

公开/公告日：2024-08-01

主分类号：C12N9/02(2006.01)

申请/专利权人:天津大学浙江研究院(绍兴)

发明/设计人:乔建军;李伟国;秦臻;田道光;赵广荣;田贵峰

主申请人地址:浙江省绍兴市杭州湾上虞经济技术开发区康阳大道88号

专利代理机构:天津市北洋有限责任专利代理事务所

代理人:陆艺

国别省市代码:浙江;33

权利要求：

1.4-羟基苯乙酸-3-羟化酶突变体，其特征在于所述4-羟基苯乙酸-3-羟化酶突变体为下列之一：SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第63位谷氨酸突变为丝氨酸；SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第478位天冬酰胺突变为丝氨酸。 2.权利要求1所述4-羟基苯乙酸-3-羟化酶突变体的编码基因。 3.含权利要求2所述编码基因的表达质粒。 4.含权利要求3所述表达质粒的基因工程菌。 5.权利要求4的基因工程菌发酵制备丹参素的应用。