SORBS1在诱导巨噬细胞极化中的应用
本发明属于生物医药领域，具体涉及SORBS1在诱导巨噬细胞极化中的应用。具体地，本发明提供了表达SORBS1或促进SORBS1表达的生物材料在诱导巨噬细胞M1型极化、抑制乳腺癌细胞上皮‑间质转化(epithelial‑mesenchymal transition，EMT)、制备高杀伤作用的巨噬细胞中的应用；所述生物材料包括编码基因、表达盒、重组载体、细胞、蛋白质。
发明专利
CN202410177337.3
2024-02-07
CN118345048A
2024-07-15
C12N5/10(2006.01)
秦皇岛市第一医院
冯凯;王益民
066099 河北省秦皇岛市海港区文化路258号
北京预立生科知识产权代理有限公司
朱萍
河北;13
1.表达SORBS1或促进SORBS1表达的生物材料在诱导巨噬细胞M1型极化、调节PI3K/AKT信号通路、抑制乳腺癌细胞上皮-间质转化、制备高杀伤作用的巨噬细胞中的应用； 优选地，所述生物材料包括编码基因、表达盒、重组载体、细胞、蛋白质； 优选地，所述重组载体是病毒载体、表达载体； 优选地，所述表达载体中还包括可操作地连接的一种或多种调控元件； 具体地，所述M1型巨噬细胞中M1型巨噬细胞标志物的表达相对于巨噬细胞提高； 优选地，所述M1型巨噬细胞标志物包括CD86、CD68，还包括IFN-γ、IL-1a、IL-1b、IL-6、IL-12、IL-23、TNF-α、CD16、CD16/CD32、CD32、CD64、CD68、CD80、CD86、CD369、Mer、MHC II、IRF5、STAT1。 2.一种组合物，所述组合物中含有表达SORBS1或促进SORBS1表达的生物材料； 优选地，所述生物材料包括编码基因、表达盒、重组载体、细胞、蛋白质； 优选地，所述重组载体是病毒载体、表达载体； 优选地，所述表达载体中还包括可操作地连接的一种或多种调控元件。 3.权利要求2所述组合物在诱导巨噬细胞M1型极化、调节PI3K/AKT信号通路、抑制乳腺癌细胞上皮-间质转化、制备高杀伤作用的巨噬细胞中的应用。 4.一种制备M1型巨噬细胞的方法，所述方法包括使用表达SORBS1的生物材料或促进SORBS1表达的生物材料处理巨噬细胞； 具体地，所述方法是使用携带SORBS1的载体转染巨噬细胞； 更具体地，所述巨噬细胞是THP-1细胞经过佛波酯刺激得到的。 5.权利要求4所述方法制备得到的M1型巨噬细胞； 具体地，所述M1型巨噬细胞中M1型巨噬细胞标志物的表达相对于巨噬细胞提高； 优选地，所述M1型巨噬细胞标志物包括CD86、CD68，还包括IFN-γ、IL-1a、IL-1b、IL-6、IL-12、IL-23、TNF-α、CD16、CD16/CD32、CD32、CD64、CD68、CD80、CD86、CD369、Mer、MHC II、IRF5、STAT1。 6.权利要求5所述M1型巨噬细胞在制备癌症药物中的应用； 优选地，所述肿瘤包括实体瘤、非实体瘤； 更优选地，所述实体瘤包括前列腺癌、膀胱癌、肾癌、肝癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、肺腺癌、宫颈癌、子宫癌、子宫内膜癌、结肠癌、直肠癌、血管内皮瘤、睾丸癌、皮肤癌； 更优选地，所述非实体瘤包括急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、造血系肿瘤、多发性骨髓瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、急性髓性白血病、B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤； 优选地，所述癌症包括乳腺癌。 7.一种鉴定巨噬细胞杀伤作用能力的方法，所述方法包括检测细胞中SORBS1的表达量； 优选地，所述表达量包括mRNA表达量和蛋白表达量； 优选地，所述检测mRNA表达量的方法包括基于PCR的检测方法、Southern杂交方法、Northern杂交方法、点杂交方法、荧光原位杂交方法、DNA微阵列方法、ASO法、高通量测序平台方法； 优选地，所述检测蛋白表达量的试剂的方法包括苏木精-伊红染色法、番红O-固绿染色、蛋白质印迹、酶联免疫吸附测定、放射性免疫测定、夹心测定、免疫组织化学染色方法、质谱法、免疫沉淀分析法、补体结合分析法、流式细胞荧光分辨技术和蛋白质芯片法。 8.检测细胞中SORBS1的表达量的试剂在鉴定巨噬细胞杀伤作用能力中的应用； 优选地，所述检测mRNA表达量的试剂包括以下方法中所使用的试剂：基于PCR的检测方法、Southern杂交方法、Northern杂交方法、点杂交方法、荧光原位杂交方法、DNA微阵列方法、ASO法、高通量测序平台方法； 优选地，所述检测蛋白表达量的试剂包括以下方法中所使用的试剂：苏木精-伊红染色法、番红O-固绿染色、蛋白质印迹、酶联免疫吸附测定、放射性免疫测定、夹心测定、免疫组织化学染色方法、质谱法、免疫沉淀分析法、补体结合分析法、流式细胞荧光分辨技术和蛋白质芯片法。 9.检测SORBS1表达量的试剂在制备诊断乳腺癌、预测乳腺癌患者预后的产品中的应用； 优选地，所述检测mRNA表达量的试剂包括以下方法中所使用的试剂：基于PCR的检测方法、Southern杂交方法、Northern杂交方法、点杂交方法、荧光原位杂交方法、DNA微阵列方法、ASO法、高通量测序平台方法； 优选地，所述检测蛋白表达量的试剂包括以下方法中所使用的试剂：苏木精-伊红染色法、番红O-固绿染色、蛋白质印迹、酶联免疫吸附测定、放射性免疫测定、夹心测定、免疫组织化学染色方法、质谱法、免疫沉淀分析法、补体结合分析法、流式细胞荧光分辨技术和蛋白质芯片法。 10.表达SORBS1或促进SORBS1表达的生物材料在制备治疗乳腺癌的产品中的应用； 优选地，所述生物材料包括编码基因、表达盒、重组载体、细胞、蛋白质。