CsNADP-ME4在提高黄瓜对干旱敏感性中的应用
本发明提供了CsNADP‑ME4在提高黄瓜对干旱敏感性中的应用，涉及植物基因工程技术领域。本发明通过构建干扰载体抑制CsNADP‑ME4基因的表达，获得CsNADP‑ME4不同表达量的黄瓜材料；通过干旱胁迫处理，衡量逆境条件下黄瓜幼苗生长的一系列生理指标和抗逆指标，发现干扰株系叶片萎蔫程度、气孔开度、相对失水率显著高于野生型，而其抗氧化物含量及其基因表达量明显低于野生型；表明CsNADP‑ME4在缓解由干旱胁迫导致的黄瓜吸水障碍方面起着十分重要的作用。本发明为培育和改良抗旱黄瓜新品种提供了基因资源，为阐明CsNADP‑ME4在黄瓜干旱逆境信号应答中的分子机制提供了理论依据。
发明专利
CN202410153251.7
2024-02-04
CN117683808A
2024-03-12
C12N15/82(2006.01)
江西农业大学
单楠;项子金;周庆红;黄英金;孙静宇;汪生林;肖遥;林佳丽;方宇帆
330045 江西省南昌市青山湖区志敏大道1101号
北京高沃律师事务所
翟羽晨
江西;36
1.抑制CsNADP-ME4基因表达在提高黄瓜对干旱敏感性中的应用，其特征在于，所述抑制CsNADP-ME4基因表达通过RNA干扰重组载体实现； 所述RNA干扰重组载体为将SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列及其反向序列替换至质粒pFGC1008的AscI和SwaI、PacI和SpeI酶切位点间得到的载体。 2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，将所述RNA干扰重组载体转化黄瓜，得到CsNADP-ME4基因表达量降低的黄瓜植株。 3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，干旱胁迫下黄瓜CsNADP-ME4基因RNA干扰植株的具体表现为：干旱处理后叶片萎蔫程度加重、气孔开度增大、相对失水率升高和/或叶片抗氧化生理指标下降。 4.一种培育干旱敏感型转基因黄瓜植株的方法，其特征在于，将权利要求1所述的RNA干扰重组载体转化到黄瓜中，降低CsNADP-ME4的表达量，提高黄瓜对干旱的敏感性。 5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述RNA干扰重组载体通过Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、显微注射、电导或农杆菌介导转化到黄瓜中。 6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述RNA干扰重组载体通过农杆菌介导转化到黄瓜中，所述农杆菌为LBA4404。