N-末端和/或C-末端切割的可溶性PH20多肽及其用途
本发明涉及一种重组PH20多肽，其中在成熟动物野生型PH20的N‑末端缺失了1至7个氨基酸残基，以及其用途。与常规重组PH20多肽相比，本发明中呈现的具有改善的酶活性和生产率的N‑末端和/或C‑末端切割的PH20多肽可表现出优异的表达和酶活性，这可导致工业使用的生产成本降低，并因此降低治疗成本。
发明专利
CN202380015218.1
2023-06-20
CN118401661A
2024-07-25
C12N9/26(2006.01)
阿特根公司
朴淳宰;金奎完;尹相勋;宋炯枏
韩国大田
北京坤瑞律师事务所
陈桉
韩国;KR
1.一种重组PH20多肽，其中，成熟动物野生型PH20的N-末端处缺失1至7个氨基酸残基。 2.根据权利要求1所述的重组PH20多肽，其特征在于，其选自由以下组成的组： (a)重组PH20多肽，其中在具有SEQ ID No.1的氨基酸序列的人野生型PH20中，在选自由N37至P42组成的组的氨基酸残基之前，通过切割缺失一个或多个N-末端氨基酸残基； (b)重组PH20多肽，其中在具有SEQ ID No.2至8中任一个的氨基酸序列的灵长类野生型PH20中，在选自由N37至P42组成的组的氨基酸残基之前，通过切割缺失一个或多个N-末端氨基酸残基； (c)重组PH20多肽，其中在具有SEQ ID No.9的氨基酸序列的牛野生型PH20中，在选自由D37至P42组成的组的氨基酸残基之前，通过切割缺失一个或多个N-末端氨基酸残基；以及 (d)重组PH20多肽，其中在具有SEQ ID No.10的氨基酸序列的绵羊野生型PH20中，在选自由D37至P42组成的组的氨基酸残基之前，通过切割缺失一个或多个N-末端氨基酸残基。 3.根据权利要求1所述的重组PH20多肽，其包含SEQ ID NO.1的氨基酸序列中起始于N37、F38、R39、A40、P41或P42的序列。 4.根据权利要求1所述的重组PH20多肽，其包含SEQ ID NO.1的氨基酸序列中起始于N37或F38的序列。 5.根据权利要求1所述的重组PH20多肽，其中，C-末端处的一些氨基酸残基进一步缺失。 6.根据权利要求5所述的重组PH20多肽，其特征在于，在SEQ ID NO.1的氨基酸序列中选自由F468至Y482组成的组的氨基酸残基之后通过切割缺失一个或多个C-末端氨基酸残基。 7.根据权利要求6所述的重组PH20多肽，其包含SEQ ID NO.1的氨基酸序列中终止于F468或Y482的序列。 8.根据权利要求1所述的重组PH20多肽，其特征在于，其选自由以下组成的组： (1)PH20多肽，其包含SEQ ID No.1的起始于N37并且终止于Y482(N37-Y482)的氨基酸序列； (2)PH20多肽，包含SEQ ID No.1的起始于N37并且终止于F468(N37-F468)的氨基酸序列； (3)PH20多肽，包含SEQ ID No.1的起始于F38并且终止于Y482(F38-Y482)的氨基酸序列；或 (4)PH20多肽，包含SEQ ID No.1的起始于F38并且终止于F468(F38-Y468)的氨基酸序列； (5)PH20多肽，包含SEQ ID No.2至8中任一个的起始于N37并且终止于L490(N37-L490)的氨基酸序列； (6)PH20多肽，包含SEQ ID No.2至8中任一个的起始于F38并且终止于L490(F38-L490)的氨基酸序列； (7)PH20多肽，包含SEQ ID No.9的起始于D37并且终止于H478(D37-H478)的氨基酸序列； (8)PH20多肽，包含SEQ ID No.9的起始于F38并且终止于H478(F38-H478)的氨基酸序列； (9)PH20多肽，包含SEQ ID No.10的起始于D37并且终止于H477(D37-H477)的氨基酸序列； (10)PH20多肽，包含SEQ ID No.10的起始于F38并且终止于H477(F38-H477)的氨基酸序列； (11)PH20多肽，包含SEQ ID No.10的起始于R39并且终止于H477(R39-H477)的氨基酸序列；以及 (12)PH20多肽，包含SEQ ID No.10的起始于A40并且终止于H477(A40-H477)的氨基酸序列。 9.一种编码根据权利要求1至8中任一项所述的重组PH20多肽的核酸。 10.一种包含根据权利要求9所述的核酸的重组表达载体。 11.一种用根据权利要求10所述的重组表达载体转染的宿主细胞。 12.根据权利要求11所述的宿主细胞，其特征在于，其选自由以下组成的组：动物细胞、植物细胞、酵母、大肠杆菌和昆虫细胞。 13.一种生产重组PH20多肽的方法，其包括培养根据权利要求12所述的宿主细胞的步骤。