StpCaP1基因在提高马铃薯对PVY和PVS病毒抗性中的应用

摘要：

本发明提供了StpCaP1基因在提高马铃薯对PVY和PVS病毒抗性中的应用。StpCaP1基因CDS序列的核苷酸长度为609bp。通过构建RNAi载体，遗传转化鄂马铃薯3号进行转基因功能验证，结果证明干涉StpCaP1基因的表达不影响植株的生长发育，且在接种病毒后能显著抑制植株中PVY和PVS两种不同病毒属病毒的积累，说明沉默StpCaP1基因的马铃薯植株在抗PVY和PVS病毒方面效果显著，是一个可应用于马铃薯抗病毒育种的功能基因。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202311811683.4

申请日期：2023-12-25

公开/公告号：CN117603998A

公开/公告日：2024-02-27

主分类号：C12N15/29(2006.01)

申请/专利权人:华中农业大学

发明/设计人:聂碧华;陈汝豪;涂振;杨曼华;陈家茹;谢芳茹

主申请人地址:430070 湖北省武汉市洪山区狮子山街1号

专利代理机构:厦门原创专利事务所(普通合伙)

代理人:林艳

国别省市代码:湖北;42

权利要求：

1.StpCaP1基因在提高马铃薯对PVS病毒抗性中的应用，其特征在于所述StpCaP1基因CDS序列如序列表SEQ ID NO.1所示。 2.StpCaP1基因在同时提高马铃薯对PVS和PVY病毒抗性中的应用，其特征在于所述StpCaP1基因CDS序列如序列表SEQ ID NO.1所示。 3.根据权利要求1和2中任何一项所述StpCaP1基因的应用，其特征在于所述应用通过干涉StpCaP1基因表达实现对病毒的抗性，干涉表达所用片段如序列表SEQ ID No.2所示。 4.马铃薯StpCaP1基因植物干涉载体构建方法，其特征在于所述方法包括：马铃薯栽培种E3的cDNA中PCR得到干涉序列；干涉StpCaP1所用片段序列为序列表SEQ ID No.2所示；将上述PCR产物进行回收。以此为模板，利用通用引物：attBl、attB2，进行第二轮PCR扩增，胶回收产物通过BP反应重组到pDNOR221载体，阳性克隆pDNOR221-StpCaP1通过LR反应重组到pHellsgate8载体，热击转化大肠杆菌DH5a，并测序验证；测序正确阳性克隆pHellsgate8-StpCaP1电击转化农杆菌GV3101,PCR检测为阳性的克隆进行保存，用于进一步的遗传转化。 5.StpCaP1基因在提高马铃薯对PVY和PVS病毒抗性中的应用验证方法，包括：(1)马铃薯遗传转化；(2)转基因阳性株系检测；(3)转基因马铃薯植株的发育表型鉴定；(4)转基因马铃薯植株的病毒抗性鉴定。 6.马铃薯StpCaP1基因，其特征在于所述StpCaP1基因CDS序列如序列表SEQ ID NO.1所示。 7.一种载体，其特征在于所述载体含有如序列表SEQ ID NO.1所示序列。 8.马铃薯StpCaP1蛋白，其特征在于所述马铃薯StpCaP1蛋白由序列表SEQ ID NO.1所示序列编码。