SLC30A5基因rs164578位点的应用、引物探针组合、及其试剂盒
本发明属于基因检测技术领域，公开了SLC30A5基因rs164578位点的应用、引物探针组合、及其试剂盒，该应用为SLC30A5基因rs164578位点在作为男性不育风险检测方法中标志物的新用途，若SLC30A5基因rs164578位点的基因型为TT基因型，则标志其患不育症的风险高于CC基因型和CT基因型。将SLC30A5基因rs164578位点用于作为男性不育风险判断的位点，通过检测rs164578位点的基因分型，对男性不育的发病机制研究、临床诊断与治疗具有十分重要的指导意义。
发明专利
CN202311620241.1
2023-11-30
CN117535399A
2024-02-09
C12Q1/6883(2018.01)
河北省生殖健康医院
马婧;邓佩佩;刘璇;谢聪聪;李欢欢;刘俊生;李悦嘉;王树松
050071 河北省石家庄市和平西路480号
石家庄科诚专利事务所(普通合伙)
申延校%刘兰芳
河北;13
1.SLC30A5基因rs164578位点作为男性不育风险检测方法中标志物的应用。 2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，将SLC30A5基因rs164578位点的基因型用于男性患不育症风险判断，若所述SLC30A5基因rs164578位点的基因型为TT基因型，则判定患不育症的风险高于CC基因型和CT基因型； 所述TT基因型的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示； 所述CC基因型的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示； 所述CT基因型的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。 3.一种用于检测如权利要求1或2所述男性不育风险检测标志物的引物探针组合，其特征在于，是检测SLC30A5基因rs164578位点基因型的引物探针组合，包括引物对和探针对； 所述引物对的序列如下： 上游引物F:5′- AAGGAAGCTGTCACTCATCTGATC -3′， 下游引物R:5′- TAATATTTTGCAAGGACTCACCCCT -3′； 所述探针对的序列如下： C等位基因探针：5′-CCATTCACACCATATGCATGG -3′， T等位基因探针：5′-CCATTCACATCATATGCATGG -3′； 其中，探针对的3′端连接有淬灭基团，5′端连接有荧光基团，且C等位基因探针和T等位基因探针中荧光基团的荧光颜色不同。 4.根据权利要求3所述的引物探针组合，其特征在于，所述淬灭基团为MGB基团。 5.根据权利要求4所述的引物探针组合，其特征在于，所述荧光基团包括CY3基团、ROX基团或CY5基团。 6. 根据权利要求3所述的引物探针组合，其特征在于，所述C等位基因探针为：5′FAM-CCATTCACACCATATGCATGG -3′MGB； 所述T等位基因探针为：5′VIC- CCATTCACATCATATGCATGG -3′MGB。 7.一种用于男性不育风险检测的试剂盒，其特征在于，该试剂盒检测的男性不育风险检测标志物为权利要求1-6中任一项所述的SLC30A5基因rs164578位点。 8.根据权利要求7所述的用于男性不育风险检测的试剂盒，其特征在于，包含权利要求4-6中任一项所述的引物探针组合。 9.一种权利要求7或8所述的用于男性不育风险检测的试剂盒的应用，其特征在于，以待测样本的基因组DNA为模板，采用所述试剂盒进行PCR扩增，并在扩增过程中进行实时荧光检测，得实时荧光检测结果； 若荧光检测结果中，仅含有T等位基因探针的荧光信号，则待测样本的SLC30A5基因rs164578位点基因型为TT基因型，判定其患不育症的风险高于CC基因型和CT基因型。 10.一种权利要求9所述的用于男性不育风险检测的试剂盒的应用，其特征在于，所述PCR扩增的程序为：95℃预变性5min，95℃变性5s，65℃延伸40s，共进行40个循环。