CRISPR酶和系统及应用
本发明属于核酸编辑领域，特别是规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)技术领域。具体而言，本发明提供了一种新型的CRISPR酶(Cas酶)，所述Cas酶属于一类新型的Cas蛋白，具有广泛的应用前景。
发明专利
CN202311618893.1
2023-11-30
CN117625578A
2024-03-01
C12N9/22(2006.01)
山东舜丰生物科技有限公司
李珊珊;刘锐恒;赵庆芝
250000 山东省济南市高新区港兴三路1号创业服务中心1号楼A座801室
山东;37
1.一种Cas蛋白，其特征在于，所述Cas蛋白为以下I-III任一所述的Cas蛋白： I、Cas蛋白的氨基酸序列与SEQ ID No.1、SEQ ID No.4、SEQ ID No.2或SEQ IDNo.3相比，具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.1％、至少99.2％、至少99.3％、至少99.4％、至少99.5％、至少99.6％、至少99.7％、至少99.8％、或至少99.9％的序列同一性，并且基本保留了其源自的序列的生物学功能； II、所述Cas蛋白的氨基酸序列与SEQ ID No.1、SEQ ID No.4、SEQ ID No.2或SEQ IDNo.3相比，具有一个或多个氨基酸的置换、缺失或添加的序列，并且基本保留了其源自的序列的生物学功能； III、所述Cas蛋白包含SEQ ID No.1、SEQ ID No.4、SEQ ID No.2或SEQ ID No.3所示的氨基酸序列。 2.一种融合蛋白，所述融合蛋白包括权利要求1所述的Cas蛋白和其他的修饰部分。 3.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸为编码权利要求1所述Cas蛋白的多核苷酸序列，或编码权利要求2所述融合蛋白的多核苷酸序列。 4.一种载体，其特征在于，所述载体包含权利要求3所述的多核苷酸以及与之可操作连接的调控元件。 5.一种CRISPR-Cas系统，其特征在于，所述系统包括权利要求1所述的Cas蛋白以及gRNA，所述gRNA能够结合权利要求1所述的Cas蛋白。 6.一种组合物，其特征在于，所述组合物包含： (i)蛋白组分，其选自：权利要求1所述的Cas蛋白或权利要求2所述的融合蛋白； (ii)核酸组分，其选自：gRNA，或编码gRNA的核酸，或gRNA的前体RNA，或编码gRNA的前体RNA核酸，所述gRNA能够结合权利要求1所述的Cas蛋白； 所述蛋白组分与核酸组分相互结合形成复合物。 7.一种工程化的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求1所述的Cas蛋白，或权利要求2所述的融合蛋白，或权利要求3所述的多核苷酸，或权利要求4所述的载体，或权利要求5所述的CRISPR-Cas系统，或权利要求6所述的组合物。 8.权利要求1所述的Cas蛋白，或权利要求2所述的融合蛋白，或权利要求3所述的多核苷酸，或权利要求4所述的载体，或权利要求5所述的CRISPR-Cas系统，或权利要求6所述的组合物，或权利要求7所述的宿主细胞在选自如下任一或任意几种中的应用：基因编辑，基因靶向，基因切割，切割双链DNA、单链DNA或单链RNA，特异性地编辑双链核酸，碱基编辑双链核酸，碱基编辑单链核酸； 或者，在制备制剂或试剂盒中的用途，所述制剂或试剂盒用于：基因编辑，基因靶向，基因切割，编辑靶基因座中的靶序列来修饰生物，疾病的治疗，或靶向靶基因。 9.一种编辑靶核酸、靶向靶核酸或切割靶核酸的方法，所述方法包括将靶核酸与权利要求1所述的Cas蛋白，或权利要求2所述的融合蛋白，或权利要求3所述的多核苷酸，或权利要求4所述的载体，或权利要求5所述的CRISPR-Cas系统，或权利要求6所述的组合物，或权利要求7所述的宿主细胞进行接触。 10.一种用于基因编辑、基因靶向或基因切割的试剂盒，所述试剂盒包括权利要求1所述的Cas蛋白，或权利要求2所述的融合蛋白，或权利要求3所述的多核苷酸，或权利要求4所述的载体，或权利要求5所述的CRISPR-Cas系统，或权利要求6所述的组合物，或权利要求7所述的宿主细胞。