SSR引物在花椰菜资源评定中的应用
本发明属于生物技术领域，提供了一种SSR引物在花椰菜种质资源鉴定中的应用，所述应用包括将所述SSR引物用于花椰菜的品种鉴定、亲缘关系评价、培育花椰菜新种质、花椰菜杂交种纯度鉴定中。本发明筛选出的29对SSR引物，扩增带型清晰，稳定性好，多态性较高，非常适用于花椰菜的品种鉴定、亲缘关系评价、培育花椰菜新种质、花椰菜杂交种纯度鉴定。
发明专利
CN202311594106.4
2023-11-27
CN117448486A
2024-01-26
C12Q1/6895(2018.01)
北京市农林科学院
孟淑春;刘凡;宋顺华;韩硕;徐秀兰;宋晓玉;王德欣;邱艳红;张海军;夏阳;王红阳;张辰希;杨业圣;徐涛;于平彬
100097 北京市海淀区板井彰化路50号
北京五洲洋和知识产权代理事务所(普通合伙)
荣红颖
北京;11
1.一种用于花椰菜品种鉴定的试剂盒，所述试剂盒中含有序列表中编号为1-58的29对SSR引物。 2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于： 所述试剂盒中还含有PCR扩增缓冲液、dNTP、Taq酶和DNA显色染料中的至少一种。 3.一种花椰菜品种的鉴定方法，所述方法包括： 采用序列表中编号为1-58的29对SSR引物分别对已知品种信息的花椰菜品种进行SSR分子标记检测，获得已知品种信息的花椰菜品种的SSR指纹图谱信息； 采用序列表中编号为1-58的29对SSR引物分别对待测花椰菜品种进行SSR分子标记检测，获得待测花椰菜品种的SSR指纹图谱信息； 将所述待测花椰菜品种的SSR指纹图谱信息，与所述已知品种信息的花椰菜品种的SSR指纹图谱信息进行比对，若待测花椰菜品种的SSR指纹图谱信息与已知品种信息的花椰菜品种的SSR指纹图谱信息的相似度达到98％以上即可判定所述待测花椰菜品种与对应的所述已知品种信息的花椰菜品种一致。 4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于： 所述SSR分子标记检测包括： 采用如下的24μL PCR反应体系： 6μL的DNA模板，2μL的10XPCR buffer，2μL的10x dye，0.4μL的10mM dNTPs，0.3μL的2.5UTaq酶，正反引物各2μL，ddH2O为9.3μL； 以及如下的PCR反应程序：94℃预变性5min；94℃变性15S，55℃退火15S，72℃延伸30S，35个循环；72℃延伸4min；16℃保存。 5.一种用于花椰菜亲缘关系评价的试剂盒，所述试剂盒中含有序列表中编号为1-58的29对SSR引物。 6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于： 所述试剂盒中还含有PCR扩增缓冲液、dNTP、Taq酶和DNA显色染料中的至少一种。 7.一种花椰菜亲缘关系评价的方法，所述方法包括： 采用序列表中编号为1-58的29对SSR引物分别对多个花椰菜品种进行SSR分子标记检测，获得多个花椰菜品种的SSR指纹图谱信息； 根据获得的多个花椰菜品种的SSR指纹图谱信息，计算多个花椰菜品种之间的遗传距离； 根据计算得到的遗传距离，判断多个花椰菜品种之间的亲缘关系。 8.一种用于培育花椰菜新种质的方法，所述方法包括采用根据权利要求7所述的花椰菜亲缘关系评价的方法得操作以判断多个花椰菜品种之间的亲缘关系，然后选择亲缘关系最远的两个花椰菜品种作为亲本材料的操作。 9.一种用于”京研四季青110”花椰菜杂交种纯度鉴定的试剂盒，所述试剂盒中含有序列表中引物对编号为1、3、15、24、25、28、29的至少一个的SSR引物对。 10.一种用于”京研四季青100”花椰菜杂交种纯度鉴定的试剂盒，所述试剂盒中含有序列表中引物对编号为3、6、15、24的至少一个的SSR引物对。