NK细胞在制备治疗免疫相关病症的药物中的用途
本发明提供了NK细胞在制备治疗免疫相关病症的药物中的用途，属于细胞生物学技术领域。本发明所提供的NK细胞为使用地衣多糖和天蚕素A联合培养后获得的NK细胞。实验检测结果发现，本发明所提供的NK细胞具有高杀伤活性和高增殖能力，对于肺癌细胞具有显著的杀伤能力。因此，本发明为NK细胞的免疫治疗提供了更优异的细胞源，后续可以将地衣多糖和天蚕素A联合培养处理的NK细胞制备成免疫药物，用于有效治疗肿瘤等免疫相关疾病，提高NK细胞的免疫治疗效果。
发明专利
CN202311478885.1
2023-11-08
CN117487750A
2024-02-02
C12N5/0783(2010.01)
青岛西凯生物技术有限公司
沈晓延;曲青梅;相爱玲
266000 山东省青岛市胶州市经济技术开发区长江路1号创业大厦
济南智圆行方专利代理事务所(普通合伙企业)
梁轶聪
山东;37
1.一种具有高杀伤活性和高增殖能力的NK细胞，其特征在于，所述NK细胞按照如下的培养方法培养得到： (1)配置含有地衣多糖和天蚕素A的NK细胞培养基； (2)使用NK细胞培养基将外周血单个核细胞重悬为细胞悬液； (3)将细胞悬液接种到CD16包被的培养瓶中； (4)置于37℃，5％CO2的细胞培养箱中进行培养，每3天补充NK细胞培养基，培养至13天，收集纯化，得到具有高杀伤活性和高增殖能力的NK细胞。 2.根据权利要求1所述的NK细胞，其特征在于，所述NK细胞培养基的成分为：250IU/mLIL-2，20ng/mL IL-12，10％自体血清，GT-T551 H3无血清培养基，75μg/mL地衣多糖，75μg/mL天蚕素A； 或250IU/mL IL-2，20ng/mL IL-12，10％自体血清，GT-T551 H3无血清培养基，100μg/mL地衣多糖，50μg/mL天蚕素A； 所述细胞悬液的细胞含量为2.5×106/ml； 所述培养瓶的CD16包被浓度为10ng/mL。 3.一种具有免疫增强作用的药物，其特征在于，所述药物由NK细胞和药学上可接受的载体组成； 所述NK细胞由如下的培养方法如下： (1)按照如下配方配置NK细胞培养基：250IU/mL IL-2，20ng/mL IL-12，100μg/mL地衣多糖，50μg/mL天蚕素A，10％自体血清，GT-T551 H3无血清培养基； (2)使用NK细胞培养基将外周血单个核细胞重悬为2.5×106/ml的细胞悬液； (3)将每10mL的细胞悬液接种到10ng/mL CD16包被的培养瓶中； (4)置于37℃，5％CO2的细胞培养箱中进行培养，每3天补充NK细胞培养基，培养至13天，收集纯化，得到NK细胞。 4.一种培养高杀伤活性和高增殖能力的NK细胞的培养方法，其特征在于，所述NK细胞的培养方法如权利要求3所述的培养方法所示。 5.一种用于提高NK细胞杀伤活性和NK细胞增殖能力的培养基，其特征在于，所述培养基按照如下配方配置： 250IU/mL IL-2，20ng/mL IL-12，100μg/mL地衣多糖，50μg/mL天蚕素A，10％自体血清，GT-T551 H3无血清培养基。 6.一种组合物在制备提高NK细胞杀伤活性的培养基中的应用，其特征在于，所述组合物由地衣多糖和天蚕素A组成，所述地衣多糖和天蚕素A的质量比例为2:1或1:1。 7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，每1mL所述组合物中，地衣多糖和天蚕素A的含量为100μg和50μg，或75μg和75μg。 8.根据权利要求7所述的应用，所述NK细胞杀伤活性为NK细胞对于肺癌细胞的杀伤活性。 9.一种组合物在制备提高NK细胞增殖能力的培养基中的应用，其特征在于，所述组合物由地衣多糖和天蚕素A组成，所述地衣多糖和天蚕素A的质量比例为2:1或1:1。 10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，每1mL所述组合物中，地衣多糖和天蚕素A的含量为100μg和50μg，或75μg和75μg。