O157:H7血清型大肠杆菌VBNC状态的诱导和抑制方法及其在水晶饼加工中的应用

摘要：

本发明提供了一种O157:H7血清型大肠杆菌VBNC状态的诱导和抑制方法及其在水晶饼加工中的应用。在冷藏或冷冻环境下，在营养物质充足时，环境条件对O157:H7血清型大肠杆菌的生存的影响效果为酸度＞营养状态＞盐浓度。在水晶饼食品体系中，通过添加体积分数为1.0％的乙酸可实现对O157:H7血清型大肠杆菌VBNC状态的消减。VBNC状态O157:H7血清型大肠杆菌的诱导及控制研究对找到逃避检测的“隐形”污染源，提高水晶饼等米面制品检测结果的准确性和检测效率具有十分重要的意义，并为O157:H7血清型大肠杆菌的预防监控奠定基础。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202311461689.3

申请日期：2023-11-06

公开/公告号：CN117683656A

公开/公告日：2024-03-12

主分类号：C12N1/20(2006.01)

申请/专利权人:华南理工大学

发明/设计人:徐振波;钟菲凤;李雪杰;刘君彦;金河坡

主申请人地址:510640 广东省广州市天河区五山路381号

专利代理机构:广州市华学知识产权代理有限公司

代理人:陆国宇

国别省市代码:广东;44

权利要求：

1.一种O157:H7血清型大肠杆菌VBNC状态的诱导方法，其特征在于包括如下步骤： (1)大肠杆菌的活化 将甘油冻存的O157:H7血清型大肠杆菌划线接种于LB固体培养基上，过夜培养后，挑取单菌落接种于LB肉汤培养基中震荡培养，取对数期的O157:H7血清型大肠杆菌用作后续实验； (2)VBNC状态的诱导和检测 将O157:H7血清型大肠杆菌接种于诱导培养基，低温培养，定期取样检测可培养活菌数，并使用荧光染料检测其VBNC状态。 2.根据权利要求1所述的诱导方法，其特征在于： 步骤(1)所述的培养的条件为32～40℃培养。 3.根据权利要求1所述的诱导方法，其特征在于： 步骤(1)所述的对数期的O157:H7血清型大肠杆菌为培养至3～8h的O157:H7血清型大肠杆菌。 4.根据权利要求1所述的诱导方法，其特征在于： 步骤(2)所述的诱导培养基包括如下组分： 2.5～10g/L胰蛋白胨，1.25～5g/L酵母提取物，9～150g/L氯化钠，余量为水。 5.根据权利要求1所述的诱导方法，其特征在于： 步骤(2)所述的低温培养为-30～10℃下培养； 步骤(2)所述的荧光染料为核酸染料SYTO 9和PI。 6.一种O157:H7血清型大肠杆菌VBNC状态的抑制方法，其特征在于包括如下步骤： 在培养体系中加入体积分数为0.1～2％的乙酸，从而抑制O157:H7血清型大肠杆菌VBNC状态的形成。 7.根据权利要求6所述的抑制方法，其特征在于： 所述的培养体系为LB培养基、诱导培养基或水晶饼。 8.权利要求1～5任一所述的O157:H7血清型大肠杆菌VBNC状态的诱导方法在食品检测中的应用。 9.权利要求6～7任一所述的O157:H7血清型大肠杆菌VBNC状态的抑制方法在食品加工中的应用。 10.根据权利要求8或9所述的应用，其特征在于： 所述的食品为水晶饼。