16个Mini Y-STR的复合扩增体系及试剂盒

引用

摘要：

本发明属于生物技术领域，涉及16个Mini Y‑STR的复合扩增体系及试剂盒，片段扩增长度小于290bp，用于补充检测市场上常规Y试剂盒大于350bp大片段基因座，在面对微量降解检材中扩增失败的样本。本发明涉及在一个PCR体系中同时扩增多个短串联重复序列，具体基因座为16个具有高度遗传多态性的Y短串联重复序列，分别设计引物并标记荧光基团，该体系具有极高的个体识别率和非父排除率，信息量大，兼容性好。本发明填补当前Y案件市场空缺，可以与市场上所有的高位点Y案件试剂盒搭配使用，在面对微量降解检材中大片段扩增失败时，使用本体系可以补全丢失大片段尽可能获取35个以上基因座完整分型数据。本发明准确性更高，灵敏性更好。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202311439587.1

申请日期：2023-11-01

公开/公告号：CN117625801A

公开/公告日：2024-03-01

主分类号：C12Q1/6888(2018.01)

申请/专利权人:苏州阅微基因技术有限公司

发明/设计人:高知枭;白洁;于在亮;陈初光

主申请人地址:215000 江苏省苏州市高新区锦峰路8号15号楼312室

专利代理机构:南京纵横知识产权代理有限公司

代理人:刘艳艳

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

1.16个MiniY-STR的复合扩增体系，其特征在于，所述复合扩增体系包括16个引物对，同时扩增16个Y-STR位点：DYS533、DYS643、DYS645、DYS388、YGATAH4、DYS518、DYS456、DYS557、DYS549、DYS393、DYS444、DYS391、DYS593、DYS596、DYS447和DYS522，16个引物对分别为：扩增DYS533的引物对序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；扩增DYS643的引物对序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；扩增DYS388的引物对序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示；扩增YGATAH4的引物对序列如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示；扩增DYS518的引物对序列如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示；扩增DYS391的引物对序列如SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示；扩增DYS549的引物对序列如SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14所示；扩增DYS447的引物对序列如SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.16所示；扩增DYS645的引物对序列如SEQ ID NO.17和SEQ ID NO.18所示；扩增DYS393的引物对序列如SEQ ID NO.19和SEQ ID NO.20所示；扩增DYS444的引物对序列如SEQ ID NO.21和SEQ ID NO.22所示；扩增DYS557的引物对序列如SEQ ID NO.23和SEQ ID NO.24所示；扩增DYS522的引物对序列如SEQ ID NO.25和SEQ ID NO.26所示；扩增DYS456的引物对序列如SEQ ID NO.27和SEQ ID NO.28所示；扩增DYS596的引物对序列如SEQ ID NO.29和SEQ ID NO.30所示；扩增DYS593的引物对序列如SEQ ID NO.31和SEQ ID NO.32所示。 2.根据权利要求1所述的复合扩增体系，所述复合扩增体系中的被扩增位点分别由五种颜色的荧光标记，相同荧光标记视为同一组，五组组合分别为：第一组DYS533、DYS643和DYS388；第二组YGATAH4和DYS518；第三组DYS391、DYS549、DYS447和DYS645；第四组DYS393、DYS444、DYS557和DYS522；第五组DYS456、DYS596和DYS593。 3.根据权利要求2所述的复合扩增体系，第一组的标记为FAM标记，第二组的标记为HEX标记，第三组的标记为TAMRA标记，第四组的标记为ROX标记，第五组的标记为PUP标记。 4.根据权利要求1或2或3所述的复合扩增体系，所述扩增体系还包括PCR缓冲液、模板DNA和Taq DNA聚合酶。 5.根据权利要求4所述的复合扩增体系，所述PCR缓冲液包括：10mM的硫酸铵，10mM的氯化钾，50mM的pH8.3的Tris-HCl，2mM的镁离子和0.2mM的dNTP，所述Taq DNA聚合酶用量为2U。 6.根据权利要求4所述的复合扩增体系，其特征在于，所述模板DNA来自于人类男性的骨骼、唾液、血液、毛发或精斑。 7.根据权利要求1所述的复合扩增体系，所述扩增体系扩增时的反应条件为：第1步：95℃变性5分钟，第2步：94℃变性10秒，第3步59℃退火延伸90s，重复2至3步30次，第4步：60℃延伸10分钟。 8.一种试剂盒，包括权利要求1-7任一项所述的复合扩增体系。 9.权利要求1-7任一项所述的扩增体系或权利要求8所述的试剂盒在个体识别、亲子鉴定以及家系排查分析中的应用。

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