let-7a在CHO细胞重组蛋白表达中的应用、表达系统
本发明属于基因工程技术领域，具体涉及let‑7a在CHO细胞重组蛋白表达中的应用、表达系统。本发明通过在CHO细胞重组蛋白表达系统中增加miRNA let‑7a的量提高重组蛋白表达量，并且设计试验验证在CHO细胞重组蛋白表达系统中直接转染let‑7a mimics能够提高目的蛋白，例如阿达木抗体，表达量；同时，通过试验验证，将let‑7a mimics编码核酸序列插入出发载体构建let‑7a过表达载体，将let‑7a过表达载体转染至CHO细胞重组蛋白表达系统，增加miRNA let‑7a的量，更高效提高目的蛋白表达量。
发明专利
CN202311439094.8
2023-11-01
CN117535292A
2024-02-09
C12N15/113(2010.01)
新乡医学院%河南普诺易生物制品研究院有限公司
张玺;王耀坤;王天云;林艳;孙秋丽;宁彬环;贾岩龙;王小引
453000 河南省新乡市红旗区新延路;
新乡市挺立众创知识产权代理事务所(普通合伙)
刘爽
河南;41
1.let-7a在CHO细胞重组蛋白表达中的应用，其特征在于，增加CHO细胞重组蛋白表达系统中miRNA let-7a的量，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。 2.如权利要求1所述应用，其特征在于，通过在CHO细胞重组蛋白表达系统中转染let-7a mimics增加CHO细胞重组蛋白表达系统中所述miRNA的量。 3.如权利要求2所述应用，其特征在于，所述let-7a mimics的转染量为30nM。 4.如权利要求1所述应用，其特征在于，通过在CHO细胞重组蛋白表达系统中转染let-7a过表达载体增加CHO细胞重组蛋白表达系统中所述miRNA的量。 5.如权利要求4所述应用，其特征在于，所述let-7a过表达载体为包含let-7a mimics编码序列的表达载体，所述let-7a mimics编码序列如SEQ ID NO.2所示。 6.一种重组蛋白表达系统，其特征在于，通过将let-7a mimics转染至CHO细胞重组蛋白表达系统构建而成； 或者通过将let-7a过表达载体转染至CHO细胞重组蛋白表达系统构建而成； let-7a mimics、let-7a过表达载体增加重组蛋白表达系统中miRNA的量，所述miRNA为cgr-let-7a，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。 7.如权利要求6所述重组蛋白表达系统，其特征在于，所述let-7a mimics的转染量为30nM； 或者所述let-7a过表达载体为包含let-7a mimics编码序列的表达载体，所述let-7amimics编码序列如SEQ ID NO.2所示。 8.如权利要求6～7所述表达系统的应用，其特征在于，用于制备包含目的蛋白的制剂； 所述制剂选自蛋白检测试剂、治疗或预防疾病的目的蛋白药物、带有目的蛋白的基因药物。 9.如权利要求8所述应用，其特征在于，所述目的蛋白为阿达木抗体。