DEAE层析替代膜包浓缩工艺

摘要：

本发明提供DEAE层析替代膜包浓缩工艺，将裂解液沉淀后制备上样样品进行DEAE层析，所述DEAE层析过程包括以下步骤：步骤一、清洗；步骤二、平衡层析；步骤三、上样；步骤四、冲洗；步骤五、洗杂；步骤六、洗脱；步骤七、再生，该DEAE层析工艺在增加超螺旋比例和产率、操作和生产工艺上有很大提高，直接运用整体柱DEAE层析后，样品较纯，体积明显缩小。仅需小体积倍数浓缩换液以保证较高回收率，同时简化了浓缩工艺，相比于传统多步浓缩纯化工艺，超螺旋质粒产品效果相当，但能够有效增加了产品研发的灵活性，降低了研发负担和研发成本，又利用该工艺普及和应用。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202311421019.9

申请日期：2023-10-30

公开/公告号：CN117660436A

公开/公告日：2024-03-08

主分类号：C12N15/10(2006.01)

申请/专利权人:宁波君健生物科技有限公司

发明/设计人:熊长云;杨勇军

主申请人地址:315800 浙江省宁波市北仑区新碶街道明州西路491号1幢1号64-2

专利代理机构:湖北创融蓝图知识产权代理事务所(特殊普通合伙)

代理人:黄太林

国别省市代码:浙江;33

权利要求：

1.DEAE层析替代膜包浓缩工艺，其特征在于：将裂解液沉淀后制备上样样品进行DEAE层析，所述DEAE层析过程包括以下步骤：步骤一、清洗；步骤二、平衡层析；步骤三、上样；步骤四、冲洗；步骤五、洗杂；步骤六、洗脱；步骤七、再生。 2.根据权利要求1所述的DEAE层析替代膜包浓缩工艺，其特征在于：所述步骤一中，使用氢氧化钠进行冲洗。 3.根据权利要求2所述的DEAE层析替代膜包浓缩工艺，其特征在于：冲洗过程中，冲洗层析柱≥1.2CV，浸泡≥0.5h。 4.根据权利要求1所述的DEAE层析替代膜包浓缩工艺，其特征在于：平衡层析中用注射用水冲洗至电导和紫外平衡。 5.根据权利要求1所述的DEAE层析替代膜包浓缩工艺，其特征在于：所述上样过程中，取澄清过滤后样品注射用水稀释混合均匀，并收集流穿液。 6.根据权利要求1所述的DEAE层析替代膜包浓缩工艺，其特征在于：所述冲洗过程中，将未吸附的杂质进行冲洗处理，冲洗量为3CV。 7.根据权利要求6所述的DEAE层析替代膜包浓缩工艺，其特征在于：所述洗脱过程中进行混匀取样后实施检测。 8.根据权利要求1所述的DEAE层析替代膜包浓缩工艺，其特征在于：使用注射用水清洗≥1.2CV后按照标准操作规程进行再生及保存。