(2S,4R)-4-羟基四氢呋喃-2-乙酸叔丁酯的生物制备方法
本发明公开了一种(2S,4R)‑4‑羟基四氢呋喃‑2‑乙酸叔丁酯的生物制备方法，包括如下步骤：第一次生物催化反应；第二次生物催化反应；分离提纯。本发明一种(2S,4R)‑4‑羟基四氢呋喃‑2‑乙酸叔丁酯的生物制备方法，以(5R)‑6‑氯‑5‑羟基‑3‑氧代己酸叔丁酯为起始原料，通过第一次生物酶体系催化反应后，在降低反应温度及提高反应pH值的条件下进行第二次生物酶体系催化反应，有效提高了目标产物(2S,4R)‑4‑羟基四氢呋喃‑2‑乙酸叔丁酯的收率和手性纯度，收率可达80％，手性纯度ee％≥99％，且该制备方法的生产成本较低，三废处理方便，适于工业化生产。
发明专利
CN202311419917.0
2023-10-30
CN117625707A
2024-03-01
C12P17/02(2006.01)
苏州华道生物药业股份有限公司
唐明国;尹步高;周圣泽;李国荣;尹步青;刘明荣
215500 江苏省苏州市常熟市江苏高科技氟化学工业园海安路6号
苏州诚逸知识产权代理事务所(特殊普通合伙)
王卫婷
江苏;32
1.一种(2S,4R)-4-羟基四氢呋喃-2-乙酸叔丁酯的生物制备方法，其特征在于，包括如下步骤： (1)第一次生物催化反应：向pH值为中性的水相缓冲溶液中加入(5R)-6-氯-5-羟基-3-氧代己酸叔丁酯和第一生物酶催化体系，在恒定pH值的条件下，反应生成(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯； (2)第二次生物催化反应：将步骤(1)中得到的反应溶液降温后，加入第二生物酶催化体系和有机溶剂，使生成的(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯全部溶解，升高体系的pH值，然后在恒定pH值的条件下反应，直至pH值不再降低时，加入阴离子交换树脂继续反应至终点； (3)分离提纯，得到所述(2S,4R)-4-羟基四氢呋喃-2-乙酸叔丁酯。 2.根据权利要求1所述的一种(2S,4R)-4-羟基四氢呋喃-2-乙酸叔丁酯的生物制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，按质量百分比计，所述第一生物酶催化体系的添加量为所述(5R)-6-氯-5-羟基-3-氧代己酸叔丁酯用量的10％～12％。 3.根据权利要求2所述的一种(2S,4R)-4-羟基四氢呋喃-2-乙酸叔丁酯的生物制备方法，其特征在于，所述第一生物酶催化体系包括葡萄糖脱氢酶、酮基还原酶、辅酶水溶液和葡萄糖。 4.根据权利要求3所述的一种(2S,4R)-4-羟基四氢呋喃-2-乙酸叔丁酯的生物制备方法，其特征在于，所述葡萄糖脱氢酶、酮基还原酶和辅酶水溶液的质量比为4:2:1到4:2:0.5，其中，所述辅酶水溶液中，辅酶的质量百分含量为1％。 5.根据权利要求3所述的一种(2S,4R)-4-羟基四氢呋喃-2-乙酸叔丁酯的生物制备方法，其特征在于，所述葡萄糖的质量为所述葡萄糖脱氢酶的5～10倍。 6.根据权利要求2-5任一项所述的一种(2S,4R)-4-羟基四氢呋喃-2-乙酸叔丁酯的生物制备方法，其特征在于，所述辅酶为还原型辅酶Ⅱ。 7.根据权利要求1所述的一种(2S,4R)-4-羟基四氢呋喃-2-乙酸叔丁酯的生物制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述水相缓冲溶液是0.1～0.3mol/L的三乙醇胺缓冲溶液。 8.根据权利要求1所述的一种(2S,4R)-4-羟基四氢呋喃-2-乙酸叔丁酯的生物制备方法，其特征在于，所述第二生物酶催化体系的加入量为底物质量的2～5％。 9.根据权利要求1或8所述的一种(2S,4R)-4-羟基四氢呋喃-2-乙酸叔丁酯的生物制备方法，其特征在于，所述第二生物酶催化体系包括卤醇脱卤酶。 10.根据权利要求1所述的一种(2S,4R)-4-羟基四氢呋喃-2-乙酸叔丁酯的生物制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述反应的温度为20℃，pH值大于7且小于等于7.5。