spike蛋白诱导COVID-19急性肺损伤的细胞模型建立方法及其应用
本发明公开了一种spike蛋白诱导COVID‑19急性肺损伤的细胞模型建立方法及应用，包括以下步骤：S10、获取人肺巨噬细胞和人肺泡上皮细胞及SARS‑CoV‑2重组spike蛋白；S20、将人肺巨噬细胞和人肺泡上皮细胞共培养第一预设时间，得共培养体系；S30、将spike蛋白加入共培养体系共培养第二预设时间，得COVID‑19急性肺损伤的细胞模型。其中共培养体系可模拟更为符合实际的肺部结构和急性肺损伤病理特征。此外，使用无传染性的spike蛋白替代传染性的SARS‑CoV‑2活病毒，无需使用生物安全3级(BSL‑3)实验室，在避免实验人员感染同时可诱导明显的病毒性肺炎病理生理改变和急性肺损伤。本建模方法符合减少使用实验动物的伦理愿望，实验条件要求不高，周期短，价格低廉，适于在COVID‑19急性肺损伤的治疗药物筛选中推广应用。
发明专利
CN202311410361.9
2023-10-27
CN117402816A
2024-01-16
C12N5/071(2010.01)
深圳市第三人民医院(深圳市肝病研究所)
彭登高;王欢;于昌平;高焱章
518100 广东省深圳市龙岗区南湾街道布澜路29号
深圳市世纪恒程知识产权代理事务所
陈源
广东;44
1.一种spike蛋白诱导COVID-19急性肺损伤的细胞模型建立方法，其特征在于，包括以下步骤： S10、获取人肺巨噬细胞和人肺泡上皮细胞及SARS-CoV-2重组spike蛋白； S20、将人肺巨噬细胞和人肺泡上皮细胞共培养第一预设时间，得共培养体系； S30、将SARS-CoV-2重组spike蛋白加入共培养体系共培养第二预设时间，得spike蛋白诱导的COVID-19急性肺损伤细胞模型。 2.如权利要求1所述的spike蛋白诱导COVID-19急性肺损伤的细胞模型建立方法，其特征在于，步骤S20中，人肺巨噬细胞与人肺泡上皮细胞的细胞数量比为1:（2~8）。 3.如权利要求1所述的spike蛋白诱导COVID-19急性肺损伤的细胞模型建立方法，其特征在于，步骤S20中，第一预设时间为12~48h。 4.如权利要求1所述的spike蛋白诱导COVID-19急性肺损伤的细胞模型建立方法，其特征在于，步骤S30中，spike蛋白在共培养体系中的质量浓度为5~15μg/mL。 5.如权利要求1所述的spike蛋白诱导COVID-19急性肺损伤的细胞模型建立方法，其特征在于，步骤S30中，第二预设时间为3~5天。 6.如权利要求1至5任意一项所述的spike蛋白诱导COVID-19急性肺损伤的细胞模型建立方法建立的细胞模型在COVID-19急性肺损伤的治疗药物筛选中的应用。