AcMT2a基因及其应用
本发明提供了一种如SEQ ID NO:1所示的AcMT2a基因及其编码基因与应用。本发明首次从猕猴桃中克隆了AcMT2a基因的全长cDNA，该基因在树皮、雌花、根、雄花和果实中表达丰度高，参与对丁香假单胞菌胁迫应答过程，且能影响猕猴桃果实的发育和后熟软化，可作为猕猴桃转基因育种的重要靶基因。将该基因转入原核表达菌株，转基因菌株在重金属离子、NaCl胁迫、过氧化氢胁迫以及高温胁迫下的生长得到明显提高，在低温胁迫下的生长得到明显抑制，也说明该基因编码的蛋白可通过清除活性氧提高植物对逆境的耐受性。所以，该基因可作为重要的基因资源，可以在猕猴桃以及其他植物或微生物的抗逆和抗重金属胁迫基因工程中得到应用。
发明专利
CN202311408592.6
2023-10-26
CN117551659A
2024-02-13
C12N15/29(2006.01)
六盘水师范学院
刘林娅;何斌;杨那;赵艳妹;宋书熠;黄亚成
553004 贵州省六盘水市钟山区明湖路288号
深圳市千纳专利代理有限公司
张新蕊
贵州;52
1.一种猕猴桃AcMT2a基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。 2.权利要求1所述猕猴桃AcMT2a基因编码的蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。 3.含有权利要求1所述猕猴桃AcMT2a基因编码区的重组载体或宿主菌。 4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于，所述原始载体为PET28a表达载体，猕猴桃AcMT2a基因编码区位于PET28a表达载体的EcoR I和SalI两限制性内切酶位点之间。 5.如权利要求1所述的猕猴桃AcMT2a基因、或者权利要求2所述的蛋白质、或者权利要求3或4所述的重组表达载体在提高原核表达菌株抗铜金属胁迫、和/或锌金属胁迫、和/或NaCl胁迫、和/或过氧化氢胁迫、和/或高温胁迫中的应用；或者 如本发明第一个方面所述的AcMT2a基因、或者本发明第二个方面所述的蛋白质、或者本发明第三个方面所述的重组表达载体在降低原核表达菌株抗低温胁迫中的应用。 6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述原核表达菌株为大肠杆菌E.coliBL21(DE3)、E.coli Rosetta或E.coli OrigamiB(DE3)。 7.如权利要求1所述的猕猴桃AcMT2a基因、或者权利要求2所述的蛋白质、或者权利要求3或4所述的重组表达载体或宿主菌在调控猕猴桃果实的发育、和/或后熟软化中的应用。 8.如权利要求1所述的猕猴桃AcMT2a基因、或者权利要求2所述的蛋白质、或者权利要求3或4所述的重组表达载体或宿主菌在调控猕猴桃对丁香假单胞菌胁迫应答中的应用。 9.如权利要求1所述的猕猴桃AcMT2a基因、或者权利要求2所述的蛋白质、或者权利要求3或4所述的重组表达载体或宿主菌在通过清除活性氧提高植物对逆境的耐受性中的应用。 10.一种引物对，其特征在于，所述引物对为：5′-TCTCTCACAACTCTCTCTCTCTC-3′和5′-TGCTTTGTAGAAGGCTGGTAATTAG-3′；或者 所述引物对为：5'-GAAAAATGTCTTGCTGCGGAG-3'和R:5'-TACATCTGGCACCACAACGAC-3'；或者 所述引物对为：5'-CCGGAATTCATGTCTTGCTGCGGAGG-3'和5'-ACGCGTCGACTCATTTGCAGGTGCAAG-3'。