N-乙酰氨基葡萄糖脱乙酰酶及转化制备氨基葡萄糖的方法
本发明公开了N‑乙酰氨基葡萄糖脱乙酰酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明属于生物催化技术领域，通过异源表达技术和金属螯合亲和层析技术表达并纯化分散泛菌Pantoea dispersa中N‑乙酰氨基葡萄糖脱乙酰酶，为工业上获得Pd‑nagA酶提供了来源，并验证了该基因编码的N‑乙酰葡萄糖脱乙酰酶具有明确的GlcNAc转化酶活性。
发明专利
CN202311350940.9
2023-10-18
CN117384893A
2024-01-12
C12N9/80(2006.01)
湖南农业大学
夏菠;庞立;蒋立文;杨文韬
410128 湖南省长沙市芙蓉区湖南农业大学
广州瑞之凡知识产权代理事务所(普通合伙)
黄爱君
湖南;43
1.一种N-乙酰氨基葡萄糖脱乙酰酶，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。 2.根据权利要求1所述的N-乙酰氨基葡萄糖脱乙酰酶，其特征在于：由源自分散泛菌Pantoea dispersa DJL-B的N-乙酰氨基葡萄糖脱乙酰酶基因编码得到；所述分散泛菌Pantoea dispersa DJL-B保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：62372。 3.根据权利要求1或2所述的N-乙酰氨基葡萄糖脱乙酰酶在转化制备氨基葡萄糖中的应用。 4.一种转化制备氨基葡萄糖的方法，其特征在于：包括如下步骤：配制含N-乙酰氨基葡萄糖底物和Co2+的缓冲溶液，加入权利要求1或2所述的N-乙酰氨基葡萄糖脱乙酰酶或含权利要求1或2所述的N-乙酰氨基葡萄糖脱乙酰酶的粗酶液进行催化转化，得到氨基葡萄糖。 5.根据权利要求4所述的转化制备氨基葡萄糖的方法，其特征在于：所述Co2+的浓度为2.5-10mmol/L。 6.根据权利要求5所述的转化制备氨基葡萄糖的方法，其特征在于：所述Co2+的浓度为5mmol/L。 7.根据权利要求4或5所述的转化制备氨基葡萄糖的方法，其特征在于：所述N-乙酰氨基葡萄糖的浓度为3-7g/L。 8.根据权利要求7所述的转化制备氨基葡萄糖的方法，其特征在于：所述N-乙酰氨基葡萄糖的浓度为5g/L。 9.根据权利要求4或5所述的转化制备氨基葡萄糖的方法，其特征在于：所述缓冲溶液为PBS缓冲溶液，其pH为7.2-8.0。 10.根据权利要求4或5所述的转化制备氨基葡萄糖的方法，其特征在于：所述催化转化的温度为40-48℃。