TAS基因突变的植株和获取该植株的方法

摘要：

本申请提供了一种TAS基因突变的植株和获取该植株的方法，该TAS基因突变的植株中突变后的TAS基因具有的核糖体结合位点数量小于野生型植株中TAS基因所具有的核糖体结合位点数量。在本申请中，TAS转录本表达水平下降并且由TAS产生的tasiRNA丰度减少，则TAS基因的转录本稳定性和生成tasiRNA的水平明显降低，这样使得该植株能够有助于研究TAS基因在植物中的调控功能，而且该植株还能够使所生成的tasiRNA序列保持不变，从而能够降低对植株中其他非靶标基因的破坏。此外，本申请提供的TAS基因突变的植株可以通过基因工程技术获得，从而使其容易获取。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202311341735.6

申请日期：2023-10-17

公开/公告号：CN117487805A

公开/公告日：2024-02-02

主分类号：C12N15/113(2010.01)

申请/专利权人:深圳大学

发明/设计人:崔洁;文启明;尤辰江;王韩;梁超

主申请人地址:518000 广东省深圳市南山区南海大道3688号

专利代理机构:深圳尚业知识产权代理事务所(普通合伙)

代理人:郑姣

国别省市代码:广东;44

权利要求：

1.一种TAS基因突变的植株，其特征在于，所述TAS基因突变的植株中突变后的TAS基因具有的核糖体结合位点数量小于野生型植株中TAS基因所具有的核糖体结合位点数量。 2.根据权利要求1所述的植株，其特征在于，所述TAS基因包括TAS2基因。 3.根据权利要求2所述的植株，其特征在于，所述TAS2基因包含如SEQ ID NO：1所示的序列。 4.根据权利要求1-3中任一项所述的植株，其特征在于，在所述TAS基因突变的植株中，突变后的TAS基因包含如SEQ ID NO：2-4所示的序列。 5.一种获取如权利要求1-4中任一项所述植株的方法，其特征在于，所述方法包括：利用基因工程技术删减野生型植株中TAS基因的转录本所具有的核糖体结合位点，以获得TAS基因突变的植株。 6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述基因工程技术包括CRISPR-Cas系统。 7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述利用基因工程技术删减野生型植株中TAS基因的转录本所具有的核糖体结合位点，以获得TAS基因突变的植株，包括： 从TAS基因的转录本中选择向导RNA特异性结合的第一靶向序列和第二靶向序列； 将向导RNA表达模块连接至具有Cas表达模块的载体，得到基因编辑载体； 利用所述基因编辑载体转化细菌，得到含有所述基因编辑载体的细菌； 将含有所述基因编辑载体的细菌浸染目标植株，以使所述基因编辑载体在所述目标植株内表达，获得TAS基因突变的植株。 8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述Cas切割的结合位点长度为100nt-260nt。 9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述Cas包括Cas9； 所述细菌包括农杆菌； 所述野生型植株包括拟南芥、烟草、水稻、小麦、玉米、棉花、油菜或大豆。 10.根据权利要求7-9中任一项所述的方法，其特征在于，所述第一靶向序列包含如SEQID NO：5-7所示的序列； 所述第二靶向序列包括如SEQ ID NO：8所示的序列。