NtRR1基因及其在调控烟草对青枯病菌抗性的应用

摘要：

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种NtRR1基因及其在调控烟草对青枯病菌抗性的应用。所述NtRR1基因的CDS序列如SEQ.ID.NO.1所示，所述调控为正向调控。基因NtRR1在提高烟草对青枯病菌抗性的应用，其特征在于，提升烟草中的NtRR1的表达水平。对烟草生长质量和产量带来正面影响，可提升烟草的经济效益，对烟草生产具有良好的现实意义。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202311293950.3

申请日期：2023-10-08

公开/公告号：CN117327728A

公开/公告日：2024-01-02

主分类号：C12N15/82(2006.01)

申请/专利权人:中国农业科学院烟草研究所(中国烟草总公司青州烟草研究所)

发明/设计人:文柳璎;孙艺文;程立锐;刘旦;杨爱国;肖志亮;斯欢;耿锐梅;任民

主申请人地址:266101 山东省青岛市崂山区科苑经四路11号

专利代理机构:广州新诺专利商标事务所有限公司

代理人:林健明

国别省市代码:山东;37

权利要求：

1.NtRR1基因及其在调控烟草对青枯病菌抗性的应用，其特征在于：所述NtRR1基因的CDS序列如SEQ.ID.NO.1所示，所述调控为正向调控。 2.基因NtRR1在提高烟草对青枯病菌抗性的应用，其特征在于，提升烟草中的NtRR1的表达水平。 3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，通过分子生物学手段提高烟草中NtRR1表达。 4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述分子生物学手段为基因编辑载体构建、超表达载体构建、农杆菌杆菌侵染中的一种或多种。 5.基因NtRR1在提高烟草对青枯病菌抗性中的应用，其特征在于，提升NtRR1功能缺失或低表达的烟草中的NtRR1的表达水平，所述NtRR1功能缺失或低表达的烟草为体内NtRR1的表达水平低于野生型烟草K326中的NtRR1的表达水平。 6.一种表达载体的应用，其特征在于，所述表达载体含有NtRR1基因并用于提高烟草对青枯病菌抗性。 7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述表达载体为pCAMBIA1300载体。 8.一种农杆菌在提高烟草对青枯病菌抗性的应用，其特征在于，利用所述农杆菌感染烟草，以提高烟草中NtRR1基因的表达，所述农杆菌含有表达载体，表达载体含有NtRR1基因。 9.一种NtRR1过表达突变体和基因编辑敲除植株的获得方法，其特征在于：将NtRR1的全长CDS插入由CaMV 35S启动子驱动的pCAMBIA1300中，生成NtRR1的过表达构建体(pCAMBIA1300-NtRR1)，使用在线网站CRTSPR Multi Targeter(http://www.multicrispr.net/index.html)设计NtRR1的特定sgRNA片段，然后合成并整合到pORE-Cas9/gDNA载体中，构建NtRR1的基因编辑载体，将构建的载体转化到农杆菌菌株EHA105中，通过农杆菌介导的叶盘转化法生产转基因烟草植物，获得NtRR1过表达突变体和基因编辑敲除植株。