DEXRAS1工具病毒的构建以及检测方法和应用

摘要：

本发明公开了DEXRAS1工具病毒的构建以及检测方法和应用，属于生物学检测和生物技术领域。本发明设计构建的针对Dexras1的工具病毒能特异地在不同脑区、不同细胞中增加或敲减Dexras1的表达，进而从不同角度探究Dexras1在慢性应激相关疾病的发生发展中的作用。此外，本发明设计的检测Dexras1mRNA水平的qPCR引物特异性好，扩增效率高；设计合成的RNA scope探针能以特异性高、杂交效率高且荧光标记强度高的特点原位标记Dexras1；设计的ELISA试剂盒能更方便快捷地检测不同组织样本的Dexras1蛋白水平。总之本发明将有助于慢性应激相关的疾病病理机制研究、疾病检测诊断以及治疗靶标和药物的筛选。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202311276693.2

申请日期：2023-10-05

公开/公告号：CN117327737A

公开/公告日：2024-01-02

主分类号：C12N15/864(2006.01)

申请/专利权人:东南大学

发明/设计人:朱丽娟;李娜;石胡江;朱星星

主申请人地址:210096 江苏省南京市江宁区东南大学路2号

专利代理机构:北京中济纬天专利代理有限公司

代理人:蒋名全

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

1.一种病毒载体，包括：Dexras1-shRNA干扰病毒载体或者Dexras1过表达病毒载体； 其中，所述Dexras1-shRNA干扰病毒载体中包含shRNA序列为SEQ ID NO.1所示； 所述Dexras1过表达病毒载体包含： SEQ ID NO.2所示的Dexras1序列；或 SEQ ID NO.2所示的Dexras1序列以及SEQ ID NO.3所示的loxp-Stop-loxp序列；或 SEQ ID NO.4所示的Dexras1位点突变序列；或 SEQ ID NO.4所示的Dexras1位点突变序列以及SEQ ID NO.3所示的loxp-Stop-loxp序列。 2.根据权利要求1所述的病毒载体，其特征在于，所述病毒载体调控原件包括CMV启动子、hsyn启动子、Cx3cr1启动子以及GFAP启动子等。 3.根据权利要求1所述的病毒载体，其特征在于，所述病毒载体包括腺病毒载体、腺相关病毒载体以及慢病毒载体等。 4.根据权利要求1所述的病毒载体，其特征在于，所述病毒载体的使用方式为脑内注射、静脉注射或者肌肉注射。 5.一种用于检测Dexras1表达变化的试剂盒，其特征在于，包括： 用于检测Dexras1 mRNA水平的qPCR引物对，序列分别为SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6；或 用于检测Dexras1 mRNA表达分布的RNA scope探针；或 用于检测Dexras1蛋白水平的ELISA试剂盒。 6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述RNA scope探针的识别位点为SEQID NO.7。 7.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述ELISA试剂盒中抗体为Dexras1单克隆或多克隆抗体。 8.权利要求1-4任一所述病毒载体、或权利要求5-7任一所述的Dexras1检测试剂盒在抑郁症、癫痫、阿尔兹海默症或慢性应激相关疾病的病理机制研究中的应用。 9.权利要求1-4任一所述病毒载体在制备用于治疗抑郁症、癫痫、阿尔兹海默症或慢性应激相关疾病的药物中的应用。 10.权利要求5-7任一所述的Dexras1检测试剂盒在制备用于治疗抑郁症、癫痫、阿尔兹海默症或慢性应激相关疾病的诊断工具中的应用。