DNA分子、生物材料以及获得抗草甘膦转基因植物的方法
本发明涉及农业生物技术领域，公开了DNA分子、生物材料以及获得抗草甘膦转基因植物的方法，本发明提供的所述DNA分子编码抗草甘膦I型EPSPS蛋白，所述DNA分子以及生物材料能够赋予植物草甘膦高抗性，最高可抗15倍草甘膦，远高于目前普遍报道的3‑4倍左右的抗性。
发明专利
CN202310081326.0
2023-01-15
CN118374517A
2024-07-22
C12N15/54(2006.01)
海南乾鸿本源生物科技有限公司
安云辉;刘川;王鹤鸣;宁卫
572025 海南省三亚市崖州区雅伦布产业园5号楼4层D-87
北京润平知识产权代理有限公司
赵泽丽
海南;46
1.一种DNA分子，其特征在于，其编码抗草甘膦I型EPSPS蛋白，其核苷酸序列为如下任一种： (1)具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或与其互补的核苷酸序列； (2)在严格条件下能够与如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列杂交的核苷酸序列； (3)来源于植物，且与如SEQ ID NO.1所示的核苷酸具有至少85％的同源性、编码抗草甘膦I型EPSPS蛋白的核苷酸序列。 2.根据权利要求1所述的DNA分子，其中，所述植物为苋草，且所述核苷酸序列为如SEQID NO.1所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加至少一个氨基酸密码子得到的编码抗草甘膦I型EPSPS蛋白的核苷酸序列。 3.一种生物材料，其特征在于，所述生物材料包含权利要求1或2所述的DNA分子； 优选地，所述生物材料为表达盒、载体、宿主细胞或转基因植物细胞系。 4.根据权利要求3所述的生物材料，其中，所述表达盒为转基因筛选表达盒，所述转基因筛选表达盒以植物源基因作为筛选标记，所述植物源基因包含权利要求1或2所述的DNA分子。 5.根据权利要求3或4所述的生物材料，其中，所述表达盒还包含用于启动和终止所述DNA分子转录的启动子和终止子； 优选地，所述启动子为组成型强启动子或绿色组织特异性启动子，更优选选自CAMV35S启动子、Ubi启动子、Actin启动子、Rubisco小亚基启动子或Cab启动子；优选地，所述Ubi启动子为玉米Ubi启动子或水稻Ubi启动子； 优选地，所述终止子为苋草EPSPS基因终止子、Ubi终止子或AtHSP终止子； 更优选地，所述启动子为水稻Ubi启动子，终止子为AtHSP终止子。 6.根据权利要求3-5中任意一项所述的生物材料，其中，所述表达盒的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。 7.根据权利要求3所述的生物材料，其中，所述载体为植物遗传转化筛选载体，其包含权利要求3-6任意一项所述的表达盒； 优选地，所述载体为植物双元表达载体； 更优选地，所述植物遗传转化筛选载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。 8.权利要求1或2所述的DNA分子或权利要求3-7中任意一项所述的生物材料的如下任一种应用： (1)在提高植物对除草剂的抗性中的应用；优选地，所述除草剂为草甘膦； (2)在选育抗除草剂植物中的应用； (3)在植物种质资源改良或制备转基因植物中的应用； (4)在作为植物遗传转化的筛选标记或筛选载体中的应用。 9.根据权利要求8所述的应用，其中，所述植物为水稻、玉米、小麦、高梁、棉花、大麦、黑麦、小米、青稞、烟草、大豆、花生、芝麻、亚麻子、茵宿、燕麦、油菜籽或拟南芥。 10.一种获得抗草甘膦转基因植物的方法，其特征在于，该方法包括将权利要求1或2所述的DNA分子转入目的植物中，得到转基因植物；然后对所述转基因植物进行抗性筛选，得到抗草甘膦转基因植物。