PCR试剂的冻干保护剂及其应用、混合试剂及其冷冻干燥方法和产品
本发明提供了一种PCR试剂的冻干保护剂及其应用、混合试剂及其冷冻干燥方法和产品，涉及生物技术领域。本发明提供的PCR试剂的冻干保护剂包括：使用浓度为62.5～87.5mg/mL的海藻糖、使用浓度为25～37.5mg/mL的PEG8000、使用浓度为15～22.5mg/mL的D‑甘露醇、使用浓度为1～1.5mg/mL的L‑组氨酸和使用浓度为1～1.5mg/mL的羟乙基淀粉；使用浓度为将冻干保护剂与PCR试剂混合后的浓度。该冻干保护剂成分简单，冻干前后性能变化小，试剂稳定性好，对PCR扩增体系无影响，能够在冷冻干燥过程中起到很高的保护作用，可适用于无甘油或低甘油含量的酶反应体系的冻干保护。
发明专利
CN202211062605.4
2022-08-31
CN117625758A
2024-03-01
C12Q1/686(2018.01)
杭州博日科技股份有限公司
陈亮;田星;王虹军;陈芝娟;贺贤汉
310000 浙江省杭州市滨江区高新技术产业开发区滨安路1192号
北京超凡宏宇知识产权代理有限公司
张金铭
浙江;33
1.一种PCR试剂的冻干保护剂，其特征在于，包括：使用浓度为62.5～87.5mg/mL的海藻糖、使用浓度为25～37.5mg/mL的PEG8000、使用浓度为15～22.5mg/mL的D-甘露醇、使用浓度为1～1.5mg/mL的L-组氨酸和使用浓度为1～1.5mg/mL的羟乙基淀粉； 所述使用浓度为将冻干保护剂与PCR试剂混合后的浓度。 2.根据权利要求1所述的冻干保护剂，其特征在于，包括：使用浓度为75mg/mL的海藻糖、使用浓度为31.25mg/mL的PEG8000、使用浓度为22.5mg/mL的D-甘露醇、使用浓度为1.25mg/mL的L-组氨酸和使用浓度为1mg/mL的羟乙基淀粉。 3.权利要求1或2所述的冻干保护剂在PCR试剂保存中的应用。 4.一种混合试剂，其特征在于，包括权利要求1或2所述的冻干保护剂和PCR试剂。 5.根据权利要求4所述的混合试剂，其特征在于，所述PCR试剂中使用甘油质量占比在0.08％以内的酶。 6.权利要求4或5所述混合试剂的冷冻干燥方法，其特征在于，包括如下步骤： 将所述混合试剂置于冷冻干燥机内，然后将冷冻干燥机的板层温度降低至-8～0℃，保持0.5～1.5h，再依次进行预冻、升华干燥和解析干燥，完成对混合试剂的冷冻干燥。 7.根据权利要求6所述的冷冻干燥方法，其特征在于，所述预冻为：将冷冻干燥机的板层温度降低至-45～-38℃，保持2-3h。 8.根据权利要求6所述的冷冻干燥方法，其特征在于，所述升华干燥为：抽真空至压强小于20pa，将冷冻干燥机的板层温度在3～4h内升高至-37～-33℃，保持6-8h。 9.根据权利要求6所述的冷冻干燥方法，其特征在于，所述解析干燥为：抽真空至压强小于5pa，将冷冻干燥机的板层温度在2～3h内升高至28～35℃，保持5-7h。 10.一种冷冻干燥产品，其特征在于，采用权利要求6-9任一项所述冷冻干燥方法制备得到。