AXMI115变体灭虫基因及其使用方法
提供了赋予细菌、植物、植物细胞、组织和种子杀虫活性的组合物和方法。毒素编码序列可以用于DNA构建体或表达盒中以在植物和细菌中表达。组合物还包括转化的细菌、植物、植物细胞、组织和种子。具体地，提供了多聚核苷酸序列以及由此所编码的毒素蛋白。还提供了与那些氨基酸序列特异性结合的抗体。具体地，本发明包括编码融合蛋白的核苷酸序列及其生物学活性变体和片段，其中所述融合蛋白含有SEQ ID NO:43的C末端部分。融合蛋白还可以含有SEQ ID NO:45的N末端部分。本发明还包括SEQ ID NO:47和1‑14的核苷酸序列，或编码SEQ ID NO:48和15‑31中所示氨基酸序列的核苷酸序列，包括其生物学活性变体和片段。
发明专利
CN201910218413.X
2012-04-04
CN110055264A
2019-07-26
C12N15/32(2006.01)
阿森尼克斯公司
D·莱特宁;N·M·德塞;V·海恩瑞奇斯
美国北卡罗来纳州
上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙)
董红曼
1.一种重组核酸分子，含有编码具有杀虫活性的多肽的核苷酸序列，其中该核苷酸序列选自： a)如SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列； b)编码包含如SEQ ID NO:21所示氨基酸序列的多肽的核苷酸序列；以及 c)编码包含有相对于SEQ ID NO:21所示氨基酸具有1至5个氨基酸取代、缺失或插入的多肽的核苷酸序列，其中该多肽的杀虫活性优于SEQ ID NO:43多肽。 2.如权利要求1所述的重组核酸分子，其中该核苷酸序列选自： a)如SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列；以及 b)编码包含如SEQ ID NO:21所示氨基酸序列的多肽的核苷酸序列。 3.如权利要求1所述的重组核酸分子，其中该核苷酸序列是设计用于在植物中表达的合成序列。 4.如权利要求1所述的重组核酸分子，其中该核苷酸序列与能够指导所述核苷酸序列在植物细胞中表达的启动子可操作性连接。 5.一种载体，包含权利要求1所述的重组核酸分子。 6.权利要求5所述的载体，其进一步包含编码异源多肽的核酸分子。 7.一种宿主细胞，其含有权利要求1所述的重组核酸分子。 8.如权利要求7所述的宿主细胞，其为细菌宿主细胞。 9.如权利要求7所述的宿主细胞，其为植物宿主细胞。 10.一种转基因植物，其包含权利要求9所述的宿主细胞。 11.如权利要求10所述的转基因植物，其中，其选自玉米、高梁、小麦、卷心菜、向日葵、番茄、十字花科植物、胡椒、马铃薯、棉花、稻、大豆、甜菜、甘蔗、烟草、大麦、和油菜。 12.一种转基因种子，其含有权利要求1所述的重组核酸分子。 13.一种重组多肽，其具有杀虫活性，其中，该多肽包含选自以下的氨基酸序列： a)如SEQ ID NO:21所示的氨基酸序列；以及 b)包含有相对于SEQ ID NO:21所示氨基酸具有1至5个氨基酸取代、缺失或插入的氨基酸序列，其中该多肽的杀虫活性优于SEQ ID NO:43多肽。 14.如权利要求13所述的重组多肽，其中，该多肽包含SEQ ID NO:21。 15.如权利要求13所述的多肽，还包含异源氨基酸序列。 16.一种组合物，其包含权利要求13所述的重组多肽。 17.如权利要求16所述的组合物，其中该组合物选自粉剂、尘剂、丸剂、粒剂、丸剂、喷雾剂、乳剂、胶体和溶液。 18.如权利要求16所述的组合物，其中所述组合物通过对细菌细胞培养物进行干燥、冻干、匀质化、提取、过滤、离心、沉淀或浓缩而制备。 19.如权利要求16所述的组合物，其包含约1重量％至约99重量％的所述重组多肽。 20.一种用于控制鳞翅目、半翅目、鞘翅目、线虫类或双翅目害虫群的方法，其包括使所述害虫群与杀虫有效量的权利要求13所述的重组多肽接触。 21.一种用于杀死鳞翅目、半翅目、鞘翅目、线虫类或双翅目害虫的方法，其包括使所述害虫接触或者对所述害虫饲喂杀虫有效量的权利要求13所述的多肽。 22.一种用于产生具有杀虫活性的多肽的方法，其包括在编码所述多肽的核酸分子表达的条件下培养权利要求7所述的宿主细胞。 23.一种植物，其基因组中稳定整合有包含核酸分子的DNA构建体，该核酸分子包含编码具有杀虫活性的多肽的核苷酸序列，其中该核苷酸序列选自： a)如SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列； b)编码包含如SEQ ID NO:21所示氨基酸序列的多肽的核苷酸序列；以及 c)编码包含有相对于SEQ ID NO:21所示氨基酸具有1至5个氨基酸取代、缺失或插入的多肽的核苷酸序列，其中该多肽的杀虫活性优于SEQ ID NO:43多肽。 24.如权利要求23所述的植物，其中该核苷酸序列选自： a)如SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列；以及 b)编码包含如SEQ ID NO:21所示氨基酸序列的多肽的核苷酸序列。 25.如权利要求24所述的植物，其中该植物为植物细胞。 26.一种用于保护植株免受害虫的方法，其包括在植株或其细胞中表达核酸分子，该核酸分子包含编码具有杀虫活性的多肽的核苷酸序列，其中，该核苷酸序列选自： a)如SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列； b)编码包含如SEQ ID NO:21所示氨基酸序列的多肽的核苷酸序列；以及 c)编码包含有相对于SEQ ID NO:21所示氨基酸具有1至5个氨基酸取代、缺失或插入的多肽的核苷酸序列，其中该多肽的杀虫活性优于SEQ ID NO:43多肽。 27.如权利要求26所述的方法，其中该核苷酸序列选自： a)如SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列；以及 b)编码包含如SEQ ID NO:21所示氨基酸序列的多肽的核苷酸序列。 28.如权利要求所述的方法，其中所述植物产生对鳞翅目、半翅目、鞘翅目、线虫类或双翅目害虫有杀虫活性的杀虫多肽。 29.一种用于增加植株产量的方法，其包括在田间种植基因组中稳定整合有包含核酸分子的DNA构建体的植株或其种子，该核酸分子包含编码具有杀虫活性的多肽的核苷酸序列，其中，该核苷酸序列选自： a)如SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列； b)编码包含如SEQ ID NO:21所示氨基酸序列的多肽的核苷酸序列；以及 c)编码包含有相对于SEQ ID NO:21所示氨基酸具有1至5个氨基酸取代、缺失或插入的多肽的核苷酸序列，其中该多肽的杀虫活性优于SEQ ID NO:43多肽。 30.如权利要求29所述的方法，其中该核苷酸序列选自： a)如SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列；以及 b)编码包含如SEQ ID NO:21所示氨基酸序列的多肽的核苷酸序列。