N-酰基高丝氨酸内酯酶-无机杂化纳米催化剂及其制备

摘要：

本发明公开了一种N‑酰基高丝氨酸内酯酶(AHL‑内酯酶)‑无机杂化纳米催化剂及其制备方法，该纳米催化剂是将有机组分——AHL‑内酯酶和无机组分——不溶性磷酸盐(如锌、镍、锰和钴等)组成，其制备方法为将AHL‑内酯酶和可溶性金属盐分别加入到磷酸盐缓冲液中，所得的混合液经静置、除去上层清液、真空干燥，即可得到粒径小、结构稳定的AHL‑内酯酶‑无机杂化纳米催化剂。本发明制备方法简单，所得的AHL‑内酯酶‑无机杂化纳米催化剂的活性较之游离酶得到显著提高，且热稳定性好，小粒径的复合物比表面积大，增加了其在反应中与底物的接触面积。且该酶底物谱广，能有效降解多种信号分子，具有较好的应用前景。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201910200067.2

申请日期：2019-03-15

公开/公告号：CN109988756A

公开/公告日：2019-07-09

主分类号：C12N9/96(2006.01)

申请/专利权人:浙江工业大学

发明/设计人:陈艳;柳鹏福;储消和;郭倩;韩笑笑;竹国津

主申请人地址:310014 浙江省杭州市下城区潮王路18号

专利代理机构:杭州求是专利事务所有限公司

代理人:赵杭丽

权利要求：

1.一种N-酰基高丝氨酸内酯酶-无机杂化纳米催化剂，其特征在于，由0.57％～31.48％的有机组分和68.52％～99.43％的无机组分组成，其中有机组分为N-酰基高丝氨酸内酯酶，无机组分为不溶性磷酸盐。 2.根据权利要求1所述的一种N-酰基高丝氨酸内酯酶-无机杂化纳米催化剂，其特征在于，所述N-酰基高丝氨酸内酯酶，是具有水解N-酰基高丝氨酸内酯分子的内酯键功能的一类生物酶。 3.根据权利要求2所述的N-酰基高丝氨酸内酯酶-无机杂化纳米催化剂，其特征在于所述N-酰基高丝氨酸内酯酶来源于Halomonas salaria或其他微生物。 4.一种N-酰基高丝氨酸内酯酶-无机杂化纳米催化剂的制备方法，其特征在于，通过以下步骤实现：向可溶性磷酸盐缓冲液中加入AHL-内酯酶，混合均匀后加入能与磷酸根形成沉淀的金属盐，然后将所得混合液静置后除去上层清液，再干燥，得到N-酰基高丝氨酸内酯酶-无机杂化纳米催化剂。 5.根据权利要求4所述的一种N-酰基高丝氨酸内酯酶-无机杂化纳米催化剂的制备方法，其特征在于，通过以下步骤实现：向pH为7～9.4的磷酸盐缓冲液中加入N-酰基高丝氨酸内酯酶，混合均匀后加入3～5mM的能与磷酸根形成沉淀的金属盐，然后将所得混合液4-25℃下静置0.5h以上后除去上层清液，再干燥，得到N-酰基高丝氨酸内酯酶-无机杂化纳米催化剂。 6.根据权利要求4所述的一种N-酰基高丝氨酸内酯酶-无机杂化纳米催化剂，其特征在于，通过以下步骤实现：向pH为8～9.4的0.01～0.1M磷酸盐缓冲液中加入来自于Halomonassalaria的N-酰基高丝氨酸内酯酶，使其终浓度为3.19～25.52μM，混合均匀后加入3～5mM的硫酸镍，然后将所得混合液置于25℃下静置后0.5h后除去上层清液，再在室温下真空干燥，得到珊瑚状Ni3(PO4)2@AHL-内酯酶杂化纳米催化剂。 7.根据权利要求4或5所述的一种N-酰基高丝氨酸内酯酶-无机杂化纳米催化剂，其特征在于，能与磷酸根形成沉淀的金属盐选用硫酸镍、硫酸锰、硫酸锌或氯化钴中的一种。