HER2基因荧光原位杂交探针及其制备方法和应用
本发明公开了一种HER2基因荧光原位杂交探针及其制备方法和应用。本发明的HER2基因荧光原位杂交探针的制备方法以及采用该制备方法制备得到的HER2基因荧光原位杂交探针，专门针对基因组非重复区设计，可以降低非特异反应，减少背景干扰；构建的探针是单链DNA，较之传统的BAC或PCR产物等双链探针，可以减少探针与自身的配对，增加杂交效率；并且构建的单链DNA探针片段小，可以更加快速的与靶向序列结合，减少杂交时间。
发明专利
CN201810155231.8
2018-02-23
CN109161580A
2019-01-08
C12Q1/6841(2018.01)I
广州简册生物技术有限公司
李怡
510000 广东省广州市广州高新技术产业开发区科学城科丰路31号华南新材料创新园G2栋209号
广州华进联合专利商标代理有限公司 44224
林青中%万志香
广东;44
1.一种HER2基因荧光原位杂交探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：构建探针文库：选择包含HER2基因的人类基因组17号染色体上非重复的目标基因区域，每隔1‑10bp构建一个与目标基因区域完全互补的长度为35nt‑200nt的单链片段作为候选探针，通过BLAST比对，获得非特异杂交的Tm值，去除非特异Tm值对于45℃的候选探针，并选择非重叠的候选探针，在筛选得到的候选探针的两端分别加上扩增引物片段，得到目的探针文库；扩增所述目的探针文库；对扩增产物进行体外转录，制备与所述目的探针文库对应的文库RNA；对所述文库RNA进行反转录，制备单链DNA探针；对制备的单链DNA探针进行荧光标记，即得。