MLF1IP基因RNA干扰的方法和试剂盒

摘要：

本发明属于生物医药和基因工程领域，涉及一种抑制MLF1IP表达的方法及其相关试剂盒。MLF1IP基因是白血病相关蛋白MLF1的结合蛋白,人肺腺癌组织样本中MLF1IP基因表达显著高于癌旁样本，抑制MLF1IP基因表达能够显著抑制人肺腺癌细胞系A549和H1299的增殖、克隆形成能力。本发明提供了一种抑制MLF1IP表达的方法及其相关试剂盒。利用本发明抑制MLF1IP的表达，方法简单易行，快速高效，成本低廉，为抑制MLF1IP提供了一个简捷的新途径。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201711399630.0

申请日期：2017-12-22

公开/公告号：CN109957564A

公开/公告日：2019-07-02

主分类号：C12N15/113(2010.01)

申请/专利权人:上海市胸科医院

发明/设计人:楼煜清;韩宝惠;张岩巍;徐建林

主申请人地址:200030 上海市徐汇区淮海西路241号

专利代理机构:上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙)

代理人:吴桂琴

权利要求：

1.一种抑制MLF1IP表达的方法，其特征在于，使用siRNA体外抑制MLF1IP的表达；所述的siRNA的目标序列如SEQ ID NO 1所示。 2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该方法依次包括如下步骤： (1)针对MLF1IP基因序列，设计RNA干扰靶点序列； (2)合成含干扰序列的双链DNA oligo； (3)连入酶切后的RNA干扰载体上，构建MLF1IP基因的RNA干扰慢病毒载体； (4)使用步骤(3)所得的载体转染体外培养的细胞，抑制MLF1IP的表达。 3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，通过脂质体将RNA干扰片段转染体外培养的细胞，抑制MLF1IP的表达。 4.如权利要求2或者3所述的方法，其特征在于，该方法还包括载体转染体外培养的细胞后，通过观察细胞的转染情况确定收集细胞的时间。 5.如权利要求1-3中任意一种方法，其特征在于，针对siRNA的目标序列合成的DNA序列如SEQ ID NO 2所示。 6.如权利要求1-3中任意一种方法，其特征在于，针对siRNA的目标序列合成的DNA序列如SEQ ID NO 3所示。 7.一种试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括权利要求2中的含干扰序列的双链DNAoligo。 8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，该试剂盒含有序列如SEQ ID NO 2所示的DNA。 9.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，该试剂盒含有序列如SEQ ID NO 3所示的DNA。 10.权利要求7所述的试剂盒的应用，其特征在于，所述的应用是该试剂盒中抑制MLF1IP表达的序列在制备抗肿瘤药剂中的应用。